目的 观察高糖环境下肾小管上皮细胞中分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)与DNA甲基转移酶(DNMTs)的表达关系，探讨5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)是否通过抑制DNMTs表达、上调SFRP5表达，从而抑制β-连环蛋白(β-catenin)信号通路及上皮间质转化(EMT)来发挥其抗肾纤维化作用。方法 取对数生长期NRK-52E细胞分为正常糖组(5.5 mmol/L,NG)和高糖组(30 mmol/L,HG),收集细胞蛋白及RNA样本，Western blot检测SFRP5及DNMTs蛋白的表达，实时聚合酶链反应(PCR)检测SFRP5的mRNA表达；取HG培养的对数期NRK-52E细胞分为HG组和HG+5-Aza-CdR组(5-Aza-CdR,80μmol/L),收集细胞蛋白及RNA样本，Western blot检测第9位丝氨酸磷酸化的糖原合酶激酶-3β(p-GSK-3βSer9)、β-catenin、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅳ型胶原蛋白(Col-Ⅳ)的表达；实时PCR检测SFRP5的mRNA表达。结果 相较NG组，HG组细胞中SFRP5蛋白和mRNA表达减少(P<0.05),DNMT1、DNMT3a、DNMT3b蛋白表达增多(P<0.05),细胞中SFRP5与DNMT1、DNMT3a、DNMT3b呈负相关；相较HG组，HG+5-Aza-CdR组细胞中SFRP5蛋白和mRNA、E-cadherin蛋白表达增高(P<0.05),DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、p-GSK-3β-Ser9、β-catenin、α-SMA及Col-Ⅳ蛋白表达降低(P<0.05)。结论 高糖培养的NRK-52E细胞中，伴随SFRP5表达降低DNMTs表达升高，5-Aza-CdR可能通过降低DNMTs表达而促进SFRP5表达，进而抑制β-catenin信号通路并改善肾小管上皮EMT。
目的 探讨血管生成素4(Ang-4)对人牙髓干细胞(hDPSCs)成牙本质向分化及碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。方法 分离鉴定后的hDPSCs细胞，根据不同浓度Ang-4分为空白对照组(0μg/L)、10μg/L、50μg/L及100μg/L组，通过CCK-8检测细胞增殖情况，划痕实验检测细胞迁移情况，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测成牙本质相关标志物牙本质涎磷蛋白(DSPP)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、牙本质基质蛋白1(DMP-1)的mRNA和蛋白表达水平，通过ALP活性测定及茜素红染色分析细胞的分化与矿化能力。结果 与0μg/L组比较，50μg/L组细胞增殖率及迁移率均显著升高(P<0.001),DSPP、RUNX2、DMP-1的mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P<0.01),ALP活性和矿化结节形成能力显著增强(P<0.001);上述效果均以50μg/L浓度最为显著。结论 Ang-4在体外能促进hDPSCs的迁移及成牙本质向分化，表明其可能是牙本质再生的一个潜在靶点。
目的 探讨氟硼二吡咯-四嗪(BODIPY-Tz)荧光分子的合成、光谱学性质及其反应动力学特性。方法 取3-氰基苄醇，采用文献方法合成化合物1,随后优化反应路线得到化合物2及按照一锅法合成化合物3(BODIPY-Tz),考察不同浓度，不同溶剂和甘油浓度对其光谱学性质的影响，并考察不同时间及温度下的化学稳定性；采用荧光光谱法和高效液相色谱(HPLC)法监测BODIPY-Tz与降冰片烯(norbornene)间的逆电子需求狄尔斯-阿尔德反应(iEDDA)动力学过程。结果 化合物2的产率得到有效提升，BODIPY-Tz在不同浓度乙腈溶液中呈非聚集态，并随溶剂极性增加，吸收波长有轻微红移，其荧光强度随甘油浓度增加而增加，在25℃和4℃下能够保持良好的化学稳定性；BODIPY-Tz的荧光开启比率随Norbornene浓度增加而增加，比值为1∶3 000时达到最大；BODIPY-Tz和iEDDA反应的产物色谱峰可得到较好的分离，且在12 h时未见BODIPY-Tz色谱峰，表明其反应完全。结论 BODIPY-Tz光谱学性质良好，在与Norbornene发生iEDDA后能够获得持续且稳定的荧光开启。
目的 探讨机械血栓切除术(MT)治疗前后循环急性大血管闭塞性缺血性卒中(AIS-LVO)临床疗效并构建预后预测模型。方法 选取2021年5月—2023年5月在沧州市人民医院神经内科接受MT治疗的AIS-LVO患者共186例，依据术后90 d改良Rankin量表(mRS)评分，将AIS-LVO患者分为预后良好组(n=72)和预后不良组(n=114);比较两组患者一般情况，入院时美国国立卫生研究院卒中量表评分(NIHSS),闭塞血管部位，入院时血压，阿尔伯塔卒中项目早期CT评分(ASPECTS),发病至入院时间，静脉溶栓情况，入院至再通时间，再通成功率，脑梗死溶栓血流分级(TICI),24 h内颅内出血，90 d mRS评分及90 d死亡率；筛选独立危险因素并建立预后预测模型；进一步采用受试者工作特征曲线(ROC)进行评估。结果 两组患者在入院时NIHSS评分、闭塞血管部位、入院时收缩压、ASPECTS评分、发病至入院时间、入院至再通时间、再通成功率、TICI分级及24 h内颅内出血发生率、90 d mRS评分及90 d病死率方面差异均有统计学意义(P<0.05),其中入院时NIHSS评分升高、入院时收缩压升高、ASPECTS评分升高、发病至入院时间延长、入院至再通时间延长及24 h内颅内出血是预后不良独立危险因素；模型预测AUC为0.892,灵敏度为81.58%,特异度为93.06%,约登指数为0.746。结论 前后循环大血管闭塞性卒中机械取栓临床疗效显著，构建预后预测模型具有较高诊断效能。
<正>《贵州医科大学学报》是医药卫生类综合性学术期刊，国内外公开发行，主要刊登医、药、卫生及生物学领域的科学研究，医疗工作中的新方法、新技术文章，主要栏目有特约述评、研究生专栏、基础研究、临床研究及医学教育等。1投稿要求1.1采用网上采编系统投稿，第一次投稿的作者请先注册，获取账号后再登陆。通过主页网址进入采编系统后，请进入“作者工作中心”，按照系统提示进行投稿操作，系统中“*”为必填项，如果不能完整填写则无法完成投稿。
目的 探讨血浆氧化三甲胺(TMAO)和苯乙酰谷氨酰胺(PAGLn)水平与冠心病及其危险分层的相关性。方法 纳入2024年1月—8月在秦皇岛中西医结合医院心内科就诊的302例冠心病患者，其中急性冠脉综合征患者(ACS)102例、缺血性心肌病患者(ICM)100例、慢性稳定性劳力型心绞痛患者(CSAP)100例及非冠心病对照人群100例；收集受试者临床资料，采用液相色谱串联质谱法测定血浆TMAO和PAGLn水平。结果 冠心病患者血浆PAGLn水平显著高于非冠心病对照(P=0.048),血浆TMAO水平两组无显著差异，但合并糖尿病的冠心病患者TMAO水平较未合并糖尿病的冠心病患者显著升高；单因素logistic回归表明血浆PAGLn升高是冠心病风险因素；ACS患者血浆PAGLn水平较非冠心病对照组和CSAP组显著升高，ROC曲线评估其对ACS风险预测AUC为0.803;冠心病合并慢性心力衰竭患者血浆PAGLn水平较非冠心病对照组显著升高，对其风险预测AUC为0.839;血浆TMAO(r=0.172,P=0.002)和PAGLn(r=0.243,P<0.001)与GRACE评分均显著正相关。结论 血浆TMAO和PAGLn可作为冠心病风险评估的临床参考指标。
目的 探究结直肠癌(CRC)组织基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、WD重复域蛋白5(WDR5)表达与临床病理特征、预后的关系。方法 选取沧州市人民医院2020年1月—2022年5月收治CRC患者130例，并采集癌组织和癌旁组织，根据患者3年内预后情况分为预后不良组51例和预后良好组79例；Kaplan-Meier生存曲线分析MMP-13、WDR5蛋白表达与患者预后的关系；COX回归分析影响因素(预后不良);相对危险度分析MMP-13、WDR5 mRNA不同水平对发生预后不良的影响；ROC曲线分析预测价值(预后不良)。结果 癌组织MMP-13、WDR5 mRNA表达水平及MMP-13、WDR5阳性表达率较癌旁组织高(P<0.05);癌组织中MMP-13、WDR5蛋白表达与TNM分期、分化程度、是否淋巴结转移有关(P<0.05);MMP-13、WDR5阳性患者生存率低于阴性患者(P<0.05)。预后不良组MMP-13、WDR5 mRNA表达水平较预后良好组高(P<0.05);不同预后组TNM分期、分化程度、是否淋巴结转移比较有差异(P<0.05);MMP-13 mRNA、WDR5 mRNA、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、低分化、淋巴结转移为影响患者预后的危险因素(P<0.05);高水平MMP-13、WDR5 mRNA患者发生预后不良的风险为低水平的2.122倍、2.057倍；MMP-13、WDR5 mRNA单独及联合预测患者预后不良的AUC为0.812、0.808、0.853,二者联合优于各自单独预测(P<0.05)。结论 CRC癌组织中MMP-13、WDR5呈高表达状态，且与患者临床特征及预后具有密切关联，联合检测对预测CRC患者预后有一定的临床价值。
目的 研究艳山姜挥发油(EOFAZ)对高糖诱导人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)焦亡的改善作用。方法 通过25 mmol/L葡萄糖诱导ARPE-19细胞损伤模型，MTT法检测细胞存活率，流式细胞术检测细胞损伤程度，蛋白免疫印迹法检测凋亡相关斑点蛋白(ASC)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1前体(Procaspase1)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cleaved caspase1)、白细胞介素-1β(IL-1β)以及gasdermin D的N端结构域(GSDMD-NT)的表达，ELISA检测细胞培养上清中IL-1β的含量；为进一步研究EOFAZ是否通过硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)发挥作用，采用蛋白免疫印迹法和RT-qPCR法检测高糖及EOFAZ对ARPE-19细胞中TXNIP的影响，免疫共沉淀检测TXNIP与NLRP3的蛋白相互作用；将TXNIP-siRNA转染到ARPE-19细胞中，利用MTT以及流式细胞术检测ARPE-19细胞的损伤程度及细胞存活率，蛋白免疫印迹法检测焦亡相关蛋白的表达，ELISA检测细胞培养上清中IL-1β的含量。结果 EOFAZ明显减轻了高糖诱导的ARPE-19细胞损伤，与模型组相比细胞存活率升高(P<0.05);模型组焦亡蛋白的表达水平均上调，细胞培养上清中IL-1β的含量增加(P<0.05);给予EOFAZ后，上述蛋白的表达水平下调，细胞培养上清中IL-1β含量降低(P<0.05);EOFAZ可下调模型组细胞中TXNIP的表达(P<0.05),并且降低TXNIP与NLRP3的结合能力；在ARPE-19细胞中转染TXNIP-siRNA后，与si-TXNIP+模型组相比，si-TXNIP+EOFAZ组中焦亡相蛋白表达水平、细胞损伤程度、IL-1β的含量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 艳山姜挥发油通过调控TXNIP/NLRP3信号抑制高糖诱导的视网膜色素上皮细胞焦亡。
目的 探讨呼肠孤病毒(Reo)是否通过CXCL10/CXCR3轴调控自然杀伤细胞(NK细胞)活化及向肿瘤细胞迁移。方法 将体外扩增的人源NK细胞分为Reo感染组(NK+Reo)和未感染对照组(NK),采用转录组测序技术(RNA-seq)检测两组细胞的差异表达基因，分析与NK细胞迁移相关的趋化因子受体CXCR3的表达变化；采用流式细胞术分析NK+Reo组中CXCR3和CD69的表达水平，免疫荧光染色检测NK细胞的CXCR3表达水平；采用定量聚合酶链反应(qPCR)和蛋白质印迹技术检测NK+Reo组CXCR3在mRNA和蛋白水平的表达量，qPCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Reo感染的结直肠癌细胞(Reo-DLD-1)中CXCL10的mRNA表达和CXCL10分泌情况；采用Transwell迁移实验评估阻断CXCR3后NK+Reo细胞向肿瘤细胞迁移和侵袭能力的变化。结果 与NK组相比，NK+Reo组存在多个差异表达基因，其中趋化因子受体CXCR3的上调最为显著(P<0.05);与DLD-1细胞相比，Reo感染后的Reo-DLD-1细胞CXCL10分泌水平显著升高(P<0.05);阻断CXCR3或CXCL10可抑制NK+Reo细胞向肿瘤细胞的迁移和侵袭能力。结论 Reo可以通过上调CXCL10/CXCR3轴的信号传导调控NK细胞向肿瘤细胞的迁移，从而增强NK细胞的抗肿瘤活性。
目的 探究穿心莲内酯(Andro)调节钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶2(CaMKK2)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠海马神经元细胞凋亡的影响。方法 构建HIBD大鼠模型，造模1 h后，将建模成功的大鼠随机分为HIBD组、L-Andro组(腹腔注射50 mg/kg的Andro)、H-Andro组(腹腔注射100 mg/kg的Andro)、H-Andro+STO-609组(腹腔注射100 mg/kg的Andro+10 mg/kg的CaMKK2特异性抑制剂STO-609),每日1次，持续7 d,每组12只；随机选取12只正常大鼠作为Ctrl组，Ctrl组、HIBD组腹腔注射等剂量的生理盐水，酶联免疫吸附试验(ELISE)法检测血清炎症因子和氧化应激水平；苏木精-伊红染色(HE)、尼氏染色(Nissl)染色观察海马组织病理学变化；末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)观察海马神经元细胞凋亡情况；蛋白质印迹法检测海马组织中CaMKK2、p-AMPK、AMPK、Bax、caspase-3、Bcl-2蛋白水平。结果 与Ctrl组相比，HIBD组神经功能评分升高，海马组织损伤显著，炎症及氧化应激指标、凋亡率、促凋亡蛋白(Bax、caspase-3)表达升高，抗炎因子(IL-10)及CaMKK2、p-AMPK/AMPK、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);Andro干预可显著改善上述指标，且高剂量效果更优(P<0.05);STO-609可逆转Andro的保护作用(P<0.05)。结论 Andro改善HIBD大鼠海马神经元细胞凋亡，其机制可能与激活CaMKK2/AMPK信号通路相关。