- 陈慧琳;操蓉;文亿;王能琴;齐晓岚;唐智;
目的 构建阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease, AD)Tau蛋白异常磷酸化体外模型，探究磷酸化TauS214对细胞焦亡及炎症的影响。方法 以NCBI中人源Tau40(h-Tau40)基因序列为模板设计突变引物，采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增目的基因，经限制性内切酶(restriction endonuclease, RE)BglⅡ和EcoR I双酶切后定向克隆到载体pEGFP-C1中，构建Tau突变体(TauS214E、TauS214A、TauP301L),测序鉴定正确后将质粒瞬时转染至HEK293T和HT22细胞，免疫荧光法检测重组Tau蛋白定位情况，蛋白质印迹法检测pTauS214、pTauS404和Tau5的表达，检测NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、Gasdermin D N端片段(GSDMD-N)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-6(IL-6)的表达水平。结果 成功构建Tau蛋白重组质粒并在两种细胞中稳定表达；Tau40和TauP301L组中pS214表达显著降低，pS404表达升高(P<0.05),NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18、IL-6表达显著增加(P<0.05);TauS214E与Tau40相比，pS214表达显著升高，pS404表达显著降低(P<0.05),NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18、IL-6表达显著降低(P<0.05)。结论 Tau40和TauP301L通过调节Tau蛋白磷酸化水平显著促进细胞焦亡和炎症反应，而TauS214E位点抑制炎性小体激活或阻断细胞焦亡。
2025年08期 v.50;No.299 1093-1105+1119页 [查看摘要][在线阅读][下载 2111K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：199 ] - 陈萍萍;范道贵;段娟娟;彭煜晖;谢欣;曾红梅;周宇;付文莉;姜依廷;张婷;易铭浩;张启芳;
目的 探讨褪黑素调控N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine, m6A)甲基化结合蛋白YTH域家族蛋白3(YTH domain family protein 3, YTHDF3)表达，对去势抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer, CRPC)细胞增殖、迁移和侵袭以及对小鼠皮下成瘤生长的影响及其机制。方法 人CRPC组织及其对应的癌旁组织通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测YTHDF3蛋白的表达，小分子对接技术预测褪黑素与YTHDF3的结合能，CCK-8法检测褪黑素处理后的CRPC细胞活力；5-乙炔-2′-脱氧尿苷(5-ethynyl-2′-deoxyuridine, EdU)增殖实验和Transwell实验检测褪黑素处理48 h后各组DU145和PC3细胞的增殖能力、迁移和侵袭能力；Western blot检测沉默YTHDF3后YTHDF3及其靶基因波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达情况，Western blot检测褪黑素处理CRPC细胞48 h后YTHDF3及其靶基因Vimentin的表达水平，放线菌素D处理对照组和沉默YTHDF3组的CRPC细胞；实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, qPCR)检测Vimentin信使RNA(messenger RNA, mRNA)的稳定性，m6A修饰位点数据库(sequence-based RNA adenosine methylation site predictor, SRAMP)预测Vimentin mRNA序列上的潜在m6A位点，RNA免疫沉淀-定量聚合酶链反应(RNA immunoprecipitation-qPCR,RIP-qPCR)检测YTHDF3与Vimentin mRNA的m6A修饰位点结合情况，褪黑素处理分别转染YTHDF3野生型(YTH domain family protein 3-wild type, YTHDF3-WT)或YTHDF3野生型(YTH domain family protein 3-mutant, YTHDF3-Mut)的VCaP细胞；Western blot检测YTHDF3表达，裸鼠皮下注射成瘤检测褪黑素治疗对于肿瘤生长的影响。结果 Western blot结果显示，CRPC组织中的YTHDF3表达高于癌旁组织(P<0.05);褪黑素可与YTHDF3的m6A芳香族笼结合，结合能为-38.96 kJ/mol;与对照组相比，褪黑素处理抑制了CRPC细胞的活力、增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05),并抑制了小鼠肿瘤的生长(P<0.01);Western blot结果表明，YTHDF3在CRPC细胞中促进Vimentin的蛋白表达(P<0.05);RNA稳定性实验结果表明与对照组相比，沉默YTHDF3后Vimentin mRNA稳定性降低(P<0.05);SRAMP预测Vimentin mRNA序列上具有10个潜在m6A位点；RIP-qPCR实验结果表明，YTHDF3与Vimentin mRNA中的m6A位点1、2、3/4和7/8/9/10结合(P<0.001);Western blot结果进一步证实，褪黑素能够阻断YTHDF3与识别并结合m6A,从而抑制YTHDF3的表达(P<0.05)。结论 褪黑素通过竞争YTHDF3与其m6A的结合位点，抑制YTHDF3及其靶基因Vimentin的表达，进而抑制CRPC细胞的活力、增殖、迁移和侵袭，并抑制肿瘤生长。
2025年08期 v.50;No.299 1106-1119页 [查看摘要][在线阅读][下载 2791K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：99 ] - 张荣瑞;丁菁;梁政伟;谢莹;吕莎;张倩;柴鑫;陆德琴;
目的 探索在心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI)中组蛋白3赖氨酸4三甲基化(trimethylation of lysine 4 on histone H3,H3K4me3)促进长链非编码RNA核富集转录本1(nuclear enriched abundant transcript 1,NEAT1)表达介导铁死亡的作用及机制。方法 16只C57BL/6小鼠随机分为假手术组(sham)组和缺血/再灌注(I/R)组，采用氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride, TTC)及苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色观察小鼠心肌梗死和病理结构变化；用H/R条件培养HL-1心肌细胞的方法复制体外MIRI模型，选择缺氧4 h(H4)及复氧1 h(H4/R1)、2 h(H4/R2)、4 h(H4/R4)时间点进行观察，用cell counting kit-8(CCK-8)法检测细胞活力，DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS),比色法分别检测丙二醛(malondialdehyde, MDA)、谷胱甘肽(glutathione, GSH)和铁离子水平，用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织和细胞谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、长链酰基辅酶A合成酶4(acyl-CoA synthetase long-chain family member 4,ACSL4)、转铁受体蛋白1(transferrin receptor 1,TfR1)、赖氨酸甲基转移酶2A(lysine methyltransferase 2A,KMT2A)、赖氨酸特异性组蛋白去甲基酶1A(lysine-specific demethylase 1A,KDM1A)等蛋白质表达水平及H3K4me3水平，qRT-PCR法检测心肌组织和细胞NEAT1表达水平；用慢病毒载体稳定转染细胞敲低NEAT1后进行H4/R4处理，观察细胞铁死亡各项指标变化；再用特异性KMT2A抑制剂MM-102(50μmol/L)预处理细胞2 h,或用慢病毒载体稳定转染细胞敲低KMT2A或过表达KDM1A后进行H4/R4处理，观察H3K4me3和NEAT1表达水平变化。结果 与sham组相比，I/R组小鼠心肌梗死面积约41%,心肌组织GPX4蛋白水平降低，ACSL4和TfR1蛋白水平增加，NEAT1表达水平升高，H3K4me3和KMT2A蛋白水平增加，KDM1A蛋白水平降低(P<0.05);与Control组相比，缺氧后随着复氧时间延长，细胞活力下降，ROS、MDA、Fe~(3+)和Fe~(2+)水平均升高，GSH含量降低，GPX4蛋白水平降低，ACSL4和TfR1蛋白水平增加，NEAT1表达水平增加，H3K4me3和KMT2A蛋白水平增加，KDM1A蛋白水平降低(P<0.05);与敲低NEAT1 NC组相比，敲低NEAT1+H4/R4组ROS、MDA、Fe~(3+)和Fe~(2+)均降低，GSH升高，GPX4蛋白表达升高，ACSL4和TfR1蛋白表达下降(P<0.05);与H4/R4组相比，MM-102+H4/R4组H3K4me3水平和NEAT1表达水平均降低(P<0.05);与敲低KMT2A Vector+H4/R4组相比，敲低KMT2A+H4/R4组H3K4me3和NEAT1表达水平降低(P<0.05);与过表达KDM1A Vector+H4/R4组相比，过表达KDM1A+H4/R4组H3K4me3和NEAT1表达水平降低(P<0.05)。结论 MIRI诱导NEAT1表达上调可介导心肌细胞铁死亡，NEAT1表达上调可能是KMT2A表达增多和KDM1A表达减少导致NEAT1基因H3K4me3修饰水平增高引起的。
2025年08期 v.50;No.299 1120-1131+1143页 [查看摘要][在线阅读][下载 2373K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：212 ] - 覃川;侯成香;王鋆柯;陈梦玲;李昊羽;魏绍峰;梁冰;
目的 探讨α-硫辛酸(alpha-lipoic acid, α-LA)是否通过激活核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)信号通路改善HepG2细胞氧化应激，进而缓解胰岛素抵抗(insulin resistance, IR)。方法 通过高糖(0.03 mol/L)联合胰岛素(10~(-6) mol/L)诱导HepG2细胞建立IR模型。采用CCK-8法检测细胞活性，葡萄糖氧化酶法检测细胞葡萄糖消耗量，比色法检测细胞己糖激酶(hexokinase, HK)、丙酮酸激酶(pyruvate kinase, PK)活性及甘油三酯(triglyceride, TG)、游离脂肪酸(free fatty acid, FFA)含量，蒽酮硫酸法检测细胞糖原含量，比色法检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活性和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量，荧光探针法检测活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量，Western blot法检细胞总Nrf2、核Nrf2(Nuc-Nrf2)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)、NAD(P)H醌氧化还原酶1[NAD(P)H quinone oxidoreductase 1,NQO1]和超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase 2,SOD2)蛋白表达水平，通过免疫荧光法和siRNA技术证明α-LA通过Nrf2改善细胞氧化应激和胰岛素抵抗。结果 α-LA显著提高IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量、糖原含量以及HK和PK酶活性(P<0.05),并显著降低TG和FFA的含量(P<0.05)。在α-LA干预下，IR-HepG2细胞氧化应激水平显著降低，包括ROS和MDA减少、抗氧化酶SOD和GSH-Px的活性增强(P<0.05),以及Nrf2通路上抗氧化蛋白表达水平(Total-Nrf2、Nuc-Nrf2、HO-1、NQO1、SOD2)显著提高(P<0.05)。沉默细胞中Nrf2基因后，α-LA改善IR-HepG2细胞氧化应激和胰岛素抵抗的能力被显著削弱。结论 α-LA可能通过降低细胞氧化应激水平改善HepG2细胞胰岛素抵抗，其机制与Nrf2信号轴的激活相关。
2025年08期 v.50;No.299 1132-1143页 [查看摘要][在线阅读][下载 2163K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：351 ] - 冯春霞;杨敏;罗俊鹏;严江松;安云飞;符纯海;张博文;杨颜静;魏微;张庆海;
目的 鉴定果蝇品系mf917的突变基因slmb,并探究其造成果蝇翅及复眼发育缺陷的原因。方法 突变品系mf917进行直接镶嵌克隆(direct mosaic clone)分析和镶嵌克隆(mosaic clone)分析，观察成虫翅及复眼的表型并解剖翅成虫盘；使用免疫荧光(immunofluorescent, IF)染色方法检测Notch、Wnt、Hippo和Hedgehog信号通路的靶基因或报告基因在mf917克隆中的表达情况，判断mf917与这些信号通路的相关性；使用反向PCR鉴定mf917中Minos转座子的插入位点及所影响的基因；利用转座子精确剪切方法检测插入mf917转座子跳除后表型是否恢复；使用mf917与已报道的slmb突变进行互补实验，进一步验证mf917与slmb的相关性。结果 突变品系mf917存在翅发育缺陷以及复眼增生等表型，三龄幼虫翅成虫盘野生型区域出现明显增生；在mf917克隆中，Notch信号靶基因Cut和Wingless(Wg)表达无明显变化，Wnt信号报告基因Dll-lacZ和fz3-lacZ表达升高，Hippo信号报告基因CycE-lacZ和ex697-lacZ表达下降、bantam sensor-GFP表达升高，Hedgehog信号报告基因ptc-lacZ和Ci蛋白在翅成虫盘前部腔室克隆中表达升高；mf917突变影响的基因是slmb。结论 mf917通过调控Wnt、Hippo和Hedgehog信号通路，从而影响果蝇翅和复眼的发育，mf917鉴定为一个slmb新突变体。
2025年08期 v.50;No.299 1144-1155页 [查看摘要][在线阅读][下载 1905K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：67 ]
- 王雨虹
;饶林海
;巨佳曦
;文双利
;朱贵明
;
目的 探讨不同年龄小鼠睾丸组织中15-羟基前列腺素脱氢酶(15-Hydroxy prostaglandin dehydrogenase, 15-PGDH)和多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids, PUFAs)的表达及对生殖能力的影响。方法 选取10只C57BL/6小鼠(WT)作为对照组，其中5只饲养至3月龄的为WT(Y)组，5只饲养至12月龄的为WT(O)组；选取10只Δ15 Des转基因小鼠(TG)作为实验组，其中5只饲养至3月龄的为TG(Y)组，5只饲养至12月龄的为TG(O)组；麻醉处死小鼠，分离睾丸和附睾组织，气相色谱技术检测睾丸组织中脂肪酸成分和含量的变化，精子质量分析仪(CASA)评估精子的运动能力，HE染色观察小鼠睾丸组织的形态结构变化，RT-qPCR技术检测基因15-PGDH、精子发生和卵子发生特异性基本螺旋-环-螺旋1(Sohlh1)、染色体结构维持蛋白1b(Smc1b)、增殖标志物Ki-67(Mki67)及双性和mab-3相关转录因子1(Dmrt1)的表达水平。结果 随着年龄增长，小鼠总脂肪酸增多；TG小鼠可将体内n-6系的花生四烯酸(ARA)转化为n-3系的二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA);随着年龄增长，小鼠睾丸精子参数略微下调，相比WT小鼠，TG小鼠精子活力参数上调；TG小鼠睾丸的生精细胞和长型精子均多于同年龄段的WT小鼠，且生精细胞排列更加紧密；以同年龄段的WT小鼠为对照，TG组小鼠睾丸中15-PGDH下调(P<0.05);随着年龄增长，15-PGDH在小鼠睾丸中上调(P<0.05)。结论 随着年龄增长小鼠睾丸组织中精子相关功能逐渐衰退，Δ15 Des转基因小鼠通过促进n-6 PUFAs向n-3 PUFAs的转化，抑制了睾丸中15-PGDH的表达，从而改善生精细胞结构与精子运动能力，最终延缓生殖衰老进程。
2025年08期 v.50;No.299 1156-1161页 [查看摘要][在线阅读][下载 1333K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：82 ] - 龚荣府;许修颖;杨娉娉;张正花;方文;
目的 构建YTH N6-甲基腺苷RNA结合蛋白3(YTH N6-methyladenosine RNA binding protein F3,YTHDF3)稳定沉默的MCF-7和MDA-MB-231乳腺癌细胞株。方法 数据库分析YTHDF3在乳腺癌中的表达及其与预后的相关性，选定蛋白研究靶点；利用人肾上皮细胞293T细胞产生含有YTHDF3-短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒颗粒，转染MCF-7和MDA-MB-231乳腺癌细胞系，并利用嘌呤霉素筛选不含嘌呤抗性的阴性细胞，构建YTHDF3稳定沉默的MCF-7和MDA-MB-231乳腺癌细胞株；将MCF-7和MDA-MB-231细胞分为阴性对照组(shNC组，转染无意义序列)、shY3-1组(转染沉默YTHDF3的第一条shRNA)及shY3-2组(转染沉默YTHDF3的第二条shRNA);实时荧光定量PCR技术(quantitative real-time polymerase chain reaction, RT-PCR)检测YTHDF3 mRNA表达，Western blot检测YTHDF3蛋白沉默效率。结果 YTHDF3在乳腺癌不同内在分子亚型中高表达，且其高表达与不良预后显著相关；经嘌呤霉素筛选后，成功获得sh-NC组、shY3-1组和shY3-2组稳定转染的MCF-7和MDA-MB-231细胞系；与sh-NC组相比，shY3-1组和shY3-2组细胞的YTHDF3蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论 初步构建了YTHDF3稳定沉默的MCF-7和MDA-MB-231乳腺癌细胞株。
2025年08期 v.50;No.299 1162-1168页 [查看摘要][在线阅读][下载 1684K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：81 ] - 刘容含;王迪;邱文;兰咏哲;李世军;康颖倩;
目的 探讨环境来源新生隐球菌CNAG＿01032毒力基因的功能。方法 通过基因枪转化和同源重组构建环境来源(野生型)新型隐球菌IFM 56731(E1)、IFM 56743(E2)和标准菌株H99的CNAG＿01032基因缺陷型突变株；检测和比较野生型菌株和突变菌株在荚膜和黑色素生成、37℃下的生长情况、应激反应和抗吞噬能力方面的差异；使用API 20C AUX测试系统检测突变株和野生型菌株对19种糖的利用情况；使用尾静脉注射法感染BALB/c雌性小鼠进行致病性检测。结果 野生型和突变型菌株在黑色素生成、37℃下的生长和应激反应方面差异没有统计学意义，但突变型菌株ΔE1和ΔE2的荚膜直径比野生型菌株E1和E2分别增加了319%和228%;在碳源利用方面，与其他菌株相比，ΔE2对侧金盏花醇的利用受到影响；小鼠毒力实验中E1和E2对小鼠无致死性，而ΔE1和ΔE2的致死率达到了100%;突变株对巨噬细胞的抗吞噬能力显著增强。结论 CNAG＿01032基因参与调控新型隐球菌环境菌株的荚膜合成，增加了荚膜直径，进而增强其抗吞噬能力和毒性。
2025年08期 v.50;No.299 1169-1176+1186页 [查看摘要][在线阅读][下载 1434K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：36 ] - 周路路;曹荷清;王海洁;李世军;赵亮;王丰;康颖倩;
目的 比较Gordonia polyisoprenivorans经体外传代后的生长特性及代谢组的变化特点。方法 利用BHI固体培养基对G.polyisoprenivoransIFM10351~T进行连续传代培养至20代，通过形态学观察、生长曲线测定、生理生化实验、海藻糖含量检测对原代与传代菌株进行分析；利用代谢组学对原代与传代菌株间的差异代谢物进行功能预测和分析。结果 G.polyisoprenivorans IFM10351~T传代至20代时，出现生长速率减缓和菌落变小的现象；扫描电镜显示T0、T20代大小比较差异无统计学意义，但T20较T0代的排列结构更立体且有皱缩现象；生理生化分析显示T20代的盐耐受能力降低，水解糖类种类变少(P<0.05);T20较T0的海藻糖含量呈下降趋势(P<0.05);代谢组学发现G.polyisoprenivorans IFM10351~TT0、T20间筛出差异代谢物588种，上调436种、下调152种；经KEGG通路富集和差异丰度得分分析筛选出相关代谢通路共75条，其中氨酰氨-tRNA生物合成、ABC转运蛋白在T20中表达下调，核苷酸代谢上调。结论 G.polyisoprenivorans经体外传20代后出现生长速率减缓、表型方面的变化，海藻糖的产生及核苷酸代谢、氨酰基-tRNA合成代谢、ABC转运代谢通路的富集显著与这些变化相关。
2025年08期 v.50;No.299 1177-1186页 [查看摘要][在线阅读][下载 1725K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：38 ] - 张乃文;徐冉;汤磊;晏英;张目;黄家宇;
目的 研究鱼腥草挥发油对兔耳痤疮模型的治疗效果。方法 采用水蒸气蒸馏法制备鱼腥草挥发油，GC-MS法检测鱼腥草挥发油的成分，并通过测定鱼腥草挥发油的最低抑菌浓度评价其抑菌活性；将24只兔随机分为空白对照组、模型组、阳性药物组(维A酸乳膏)及鱼腥草挥发油组；通过涂抹煤焦油14 d,于第7、9、11、13天时在兔耳耳管开口处皮下注射痤疮丙酸杆菌菌液建立兔耳痤疮模型；各组涂抹给药14 d后，肉眼观察兔耳痤疮病变；取兔耳组织制作切片，HE染色观察组织学特征；取兔血清，采用ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的水平，评价鱼腥草挥发油对兔耳痤疮的治疗效果。结果 在鱼腥草挥发油中鉴定出了126个组分，鱼腥草挥发油对痤疮丙酸杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为0.281、0.156、0.078 g/L;兔耳痤疮模型给药14 d后，与模型组比较，鱼腥草挥发油组兔耳丘疹、毛囊开口面积有所缩小，兔血清的TNF-α和IL-6水平均有显著降低，差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 鱼腥草挥发油具有较好的抑菌活性和抗炎活性，对兔耳痤疮模型有显著的治疗效果。
2025年08期 v.50;No.299 1187-1195+1219页 [查看摘要][在线阅读][下载 1295K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：248 ] - 熊晓灿;余平;
目的 探究巴马汀通过调控Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)/信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)通路抗脓毒症的作用机制。方法 将90只BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、巴马汀组(5.0 mg/kg)、Coumermycin A1组(JAK2激活剂，4.0 mg/kg)、AG490组(JAK2抑制剂，8.0 mg/kg),以及巴马汀+Coumermycin A1组，每组15只。用红外额温度计检测体温，苏木精伊红染色观察肺、肝、肾组织病理，酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和C-反应蛋白水平，Western blot检测血液中JAK2、STAT3、高迁移率族蛋白-1、TOLL样受体4(TOLL-like receptor 4,TLR4)蛋白表达。将小鼠RAW264.7巨噬细胞分为对照组、脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)组及巴马汀(16、64、128 mg/L)组，用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)法、比色法分别检测细胞增殖和乳酸脱氢酶释放，免疫细胞化学染色检测TLR4及JAK2阳性表达。另取RAW264.7细胞分为正常对照组、LPS组、巴马汀组(128 mg/L)、Ad-JAK2组、Ad-NC组及巴马汀+Ad-JAK2组，MTT法检测细胞增殖，免疫细胞化学染色法检测TLR4及JAK2阳性表达，ELISA法检测TNF-α、IL-6水平，反转录酶-聚合酶链反应法检测JAK2、STAT3基因表达。结果 与空白组比较，模型组小鼠腹泻、死亡及肝、肾、肺组织炎性浸润严重，体温升高，血清炎症因子及血液中单核细胞JAK2/STAT3通路及相关蛋白表达升高(P<0.05);巴马汀及AG490可抑制JAK2/STAT3通路及相关蛋白表达，缓解小鼠死亡及肝、肾、肺组织炎性浸润，抑制小鼠体温升高及血清炎性因子表达(P<0.05),相反Coumermycin A1可逆转巴马汀上述作用(P<0.05);体外实验发现，巴马汀可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞增殖、JAK2及STAT3表达且呈剂量依赖性，但不影响乳酸脱氢酶释放(P<0.05);上调JAK2表达可逆转巴马汀抑制RAW264.7细胞增殖、TNF-α及IL-6炎性因子分泌、JAK2/STAT3通路及TLR4表达的作用(P<0.05)。结论 巴马汀抗脓毒症炎性反应的作用机制与抑制JAK2/STAT3通路有关。
2025年08期 v.50;No.299 1196-1206页 [查看摘要][在线阅读][下载 1973K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：128 ]
- 孙季威;宋健;李宁;蔡龙杰;
目的 在高血压脑出血患者中分析水通道蛋白4 (aquaporin 4,AQP-4)、6-酮前列环素F1α (6-ketoprostacycline F1α,6-Keto-PGF1α)的表达水平与患者术后脑功能及预后的相关性。方法 选取2021年9月—2023年9月手术治疗的99例高血压脑出血患者为观察对象，根据术后1个月的格拉斯哥预后评分将患者分为预后良好组和预后不良组，分析血清AQP-4、6-Keto-PGF1α的表达水平与患者术后脑功能(格拉斯哥-匹兹堡脑功能评分)的相关性；比较两组患者AQP-4、6-Keto-PGF1α水平，logistic回归分析AQP-4、6-Keto-PGF1α与高血压脑出血患者预后的相关性；建立受试者工作特征曲线评估AQP-4、6-Keto-PGF1α对高血压脑出血患者预后的预测价值。结果 患者术后AQP-4的表达水平为(154.21±26.65)μg/L,6-Keto-PGF1α的表达水平为(14.86±3.42)pg/ml; AQP-4的表达水平与预后评分呈正相关，而6-Keto-PGF1α的表达水平与预后评分呈负相关(P<0.05);预后良好组AQP-4的表达水平低于预后不良组，6-Keto-PGF1α的表达水平高于预后不良组(P<0.05);高表达的AQP-4、低表达的6-Keto-PGF1α是高血压脑出血患者预后不良的危险因素(P<0.05);AQP-4、6-Keto-PGF1α预测高血压脑出血患者预后的曲线下面积分别为0.957和0.880(P<0.05)。结论 AQP-4、6-Keto-PGF1α的表达水平与高血压脑出血患者术后脑功能密切相关，AQP-4、6-Keto-PGF1α是影响患者不良预后的相关危险因素，两者联合检测能够在临床上协助预测高血压脑出血预后不良的患者。
2025年08期 v.50;No.299 1207-1212页 [查看摘要][在线阅读][下载 1133K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：89 ] - 刘文明;李小英;袁自华;
目的 探讨心脏型脂肪酸结合蛋白(heart type fatty acid binding protein, h-FABP)不同水平的病毒性心肌炎患者临床特征及预后。方法 120名病毒性心肌炎患者据入院时h-FABP水平分为低水平组(h-FABP<50.36μg/L,n=52)和高水平组(h-FABP≥50.36μg/L,n=68),收集2组患者的一般基线资料[年龄、性别、体质量指数(body mass index, BMI)、合并呼吸道感染、合并消化道感染及病情严重程度];抽取2组患者入院当日空腹静脉血，采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)法检测血清h-FABP水平，采用放射免疫法检测肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponinⅠ,cTnI)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme, CK-MB)、肌红蛋白(myoglobin, Mb)及25-羟基维生素D[25-hydroxy vitamin D,25(OH)D]水平，采用免疫分析仪检测白细胞计数(white blood cell count, WBC)水平，速率散射比浊法检测超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein, hs-CRP)及淀粉样蛋白A(amyloid protein A,SAA)水平；采用24 h动态心电图检测快速性心律失常、Q波-R波-S波群(Q wave-R wave-S wave complex, QRS)波时限延长、心率变异性高频(high frequency, HF)及低频(low frequency, LF)指标，超声心动图检测左心室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF)、每搏输出量(stroke output, SV)、每分输出量(output per minute, CO)、左室后壁厚度(left ventricular posterior wall, LVPW)、室间隔(interventricular septum, IVS)及左室收缩期内径(left ventricular internal dimension systole, LVDS)水平；2组患者连续治疗14 d,治疗完成后随访6个月评估预后良好与否；绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析h-FABP对病毒性心肌炎患者预后的预测价值。结果 高水平组患者中重症、快速性心律失常、QRS波时限延长占比、LVPW、IVS、LVDS、cTnI、CK-MB、WBC、hs-CRP、Mb、SAA水平及预后不良发生率均高于低水平组，LVEF、SV、CO、HF、LF及25(OH)D水平则低于低水平组(P<0.05);低水平和高水平h-FABP预测病毒性心肌炎患者预后的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.848和0.867。结论 与h-FABP低水平的病毒性心肌炎患者相比，h-FABP高水平的病毒性心肌炎患者病情程度、心功能损伤及炎性反应均较重，且预后不良发生率较高。
2025年08期 v.50;No.299 1213-1219页 [查看摘要][在线阅读][下载 1162K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：63 ] - 王侣金;兰冰雪;杨雪;张禾璇;汤贤英;夏开德;金平;张琳琳;黄海;
目的 探讨贵阳及周边地区罕见珠蛋白基因突变类型及分布情况，为血红蛋白病的基因诊断及遗传咨询提供参考依据。方法 收集地中海贫血基因检测的人群样本5574例，筛选出符合条件的588例全血样本，运用跨越断裂位点PCR(Gap-polymerase chain reaction, Gap-PCR)检测缺失型突变、采用双脱氧链终止(Sanger测序)法进行基因序列测定，分析受检者是否携带罕见珠蛋白基因突变类型。结果 在588例标本中，共检出罕见珠蛋白基因突变97例，阳性率为16.50%(97/588),主要为α和β珠蛋白基因突变，分别占27.83%(27/97)和50.52%(49/97),γ珠蛋白基因突变9例，δ珠蛋白基因突变2例，复合型突变10例；97例突变中基因型共50种，其中IVS-II-462(C>T) in β,IVS-II-676(A>C) in β,IVS-II-820(C>T) in β,Codon112(-C) in α2,Codon125(CTG>TTG) in α2,IVS-I-60(C>T) in α1,NG＿000007.3:g.64760(T>C) in δ,-314(G>T) in Aγ为新发现的基因突变类型。结论 对于血液学筛查结果与基因检测结果不符，或表型与基因型不一致的受检者，建议进一步开展罕见珠蛋白基因突变检测，以明确其基因型，这不仅有助于降低血红蛋白病的漏检率，还可为预防出生缺陷、遗传咨询以及产前诊断等提供科学依据。
2025年08期 v.50;No.299 1220-1229页 [查看摘要][在线阅读][下载 1158K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：56 ] - 刘文涛;王丽;党庆浩;张宏泽;
目的 探讨颅内动脉瘤患者血清缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cysteine aspartate protein hydrolase-3,Caspase-3)、微小RNA-143(microRNA-143,miR-143)水平与动脉瘤破裂的关系。方法 143例颅内动脉瘤患者作为病例组，根据颅内动脉瘤破裂与否分为未破裂组(n=95)和破裂组(n=48),另选取同期健康体检人群138例作为对照组，收集各组受检者的一般资料(年龄、性别及体质量指标);抽取病例组患者入院日、对照组体检者体检日空腹肘静脉血离心，采用酶联免疫吸附试验和实时荧光定量PCR检测各组受检者血清HIF-1α、Caspase-3及miR-143水平；随访病例组患者术后3个月，采用CT血管造影检查患者的动脉瘤影像特征(动脉瘤标准化表面最大压力、瘤体宽径、形状不规则占比、载瘤动脉宽度、低剪切力面积比值、动脉瘤标准化表面平均压力、瘤体长径、瘤径宽度、瘤体最长径、平均壁面剪切力及动脉瘤位置)并判断颅内动脉瘤破裂与否，采用多因素logistic分析病例组患者颅内动脉瘤破裂的影响因素，采用Spearman相关分析和ROC曲线分析病例组患者血清HIF-1α、Caspase-3、miR-143水平与颅内动脉瘤破裂的相关性及预警价值。结果 病例组患者血清Caspase-3、HIF-1α高于对照组，miR-143水平低于对照组(P<0.05);破裂组颅内动脉瘤患者血清miR-143水平和瘤体宽径低于未破裂组，血清HIF-1α、Caspase-3及低剪切力面积比值、瘤体最长径、形状不规则占比、瘤体长径、平均壁面剪切力水平高于未破裂组(P<0.05);logistic分析结果显示，血清Caspase-3、miR-143、HIF-1α及低剪切力面积比值、瘤体宽径、瘤体长径、平均壁面剪切力、瘤体最长径、形状不规则是颅内动脉瘤破裂的影响因素(P<0.05);Spearman相关分析结果显示，血清miR-143与患者颅内动脉瘤破裂呈负相关(P<0.05),血清Caspase-3、HIF-1α与患者颅内动脉瘤破裂呈正相关(P<0.05);血清miR-143、Caspase-3及HIF-1α预测颅内动脉瘤破裂的曲线下面积(AUC)分别为0.716、0.689及0.702,3者联合预测颅内动脉瘤破裂的AUC为0.802大于单独指标预测。结论 血清高HIF-1α、Caspase-3水平及低miR-143水平是颅内动脉瘤破裂的影响因素，且3者联合预测价值更高。
2025年08期 v.50;No.299 1230-1236页 [查看摘要][在线阅读][下载 1149K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：70 ] - 简涛;刘兴德;吴贞羲;周海燕;
目的 探讨血小板参数血小板平均体积(mean platelet volume, MPV)、血小板分布宽度(platelet distribution width, PDW)及血小板/淋巴细胞比率(platelet-to-lymphocyte ratio, PLR)对冠心病(coronary heart disease, CHD)患者短期主要不良心血管事件(major adverse cardiac events, MACE)的预测价值。方法 选择贵州医科大学附属医院2023年11月—2024年9月行冠状动脉造影术(coronary angiography, CAG)明确诊断CHD患者302例，分别按照住院期间是否发生MACE分为两组，MACE组(n=67)与非MACE组(n=235);收集和整理所有入组患者入院24 h内的临床基线资料、血脂、氨基末端脑钠肽前体、血常规并计算PLR等；通过CAG结果计算Gensini分值，比较两组间一般基线资料、MPV、PDW、PLR等的差异性；采用单因素、多因素logistic回归分析评估不良事件发生的影响因素；绘制受试者工作特性(ROC)曲线，以ROC曲线下面积(area under curve,AUC)为统计指标分析MPV和/或PDW和/或PLR对不良事件的预测价值。结果 与非MACE组相比，MACE组MPV、PDW、PLR值显著升高，差异均有统计学意义(P<0.05),MPV、PDW、PLR是CHD患者住院期间MACE发生的危险因素；校正混杂因素后多因素logistic回归分析显示，PLR(OR=1.01,95%CI:1.01～1.01,P=0.001);MPV(OR=1.85,95%CI:1.09～3.13,P=0.022),提示PLR、MPV仍为CHD患者住院期间发生MACE独立危险因素；在住院期间MACE预测方面，MPV的AUC=0.793,P<0.001; PDW的AUC=0.750,P<0.001;PLR的AUC=0.603,P=0.010;MPV的诊断界值为10.95 fL时，预测住院期间MACE事件的灵敏度为61%、特异度为91%,PDW诊断界值为13.35%时，预测住院期间MACE事件的灵敏度为58%、特异度为90%,PLR诊断界值为179.74时，预测住院期间MACE事件的灵敏度为79%、特异度为49%。结论 MPV、PDW、PLR是CHD患者住院期间MACE发生的危险因素，MPV、PDW对CHD患者住院期间是否发生MACE事件有较好的预测能力，而PLR预测能力相对较弱。
2025年08期 v.50;No.299 1237-1243页 [查看摘要][在线阅读][下载 1148K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：93 ]