- 杨俊;王倩倩;姜良霞;罗瑛;
目的 研究抑癌基因TP53(tumor protein 53, TP53)突变后编码的蛋白(p53N236S, p53S)通过下游调节元件拮抗调节剂/髓细胞组织增生病毒癌基因同源物-多细胞B类复合物(DP, RB-like, E2F, and MuvB complex/Myb-MuvB complex, DREAM/MMB)通路对Werner综合征(werner syndrome, WS)细胞端粒DNA复制的调控作用及其机制。方法 以引入p53S突变的第五代WS小鼠胚胎成纤维细胞(G5TM)为研究对象，以野生型(WT)、第五代WS小鼠(G5DM)及敲除p53的第五代WS小鼠(G5TKO)胚胎成纤维细胞为对照，蛋白印记法(Western blot)检测各组细胞中DREAM/MMB相关蛋白和细胞周期相关蛋白的表达，染色质免疫沉淀法(Co-IP)检测各组细胞中DREAM/MMB通路调控关键蛋白与其相互作用蛋白的结合；染色质免疫沉淀法(ChIP)检测三种基因型细胞中(WT、G5DM、G5TM)p53与DAERM/MMB通路基因启动子的结合情况，免疫荧光-荧光原位杂交技术法(immunofluorescence-fluorescence in situ hybridization, IF-FISH)检测各组细胞中DNA解旋酶和端粒保护蛋白以及DNA损伤标志蛋白同端粒信号的共定位情况，端粒DNA实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction, qPCR)检测各组细胞端粒的相对长度。结果 Western blot结果表明，在G5TM细胞中p53S蛋白表达显著上调，下游靶基因p21在G5TM及G5KO细胞中表达被抑制(P<0.05);通过对比WT、G5DM及G5TKO细胞，发现p53S特异性激活DREAM/MMB复合体通路，关键组分B-Myb、FoxM1、p130、p-Rb、Lin54、Lin9和E2f1的表达均被上调(P<0.05);Co-IP实验揭示，p53S通过增强Lin9与p130及B-Myb的相互作用，促进DREAM/MMB复合体的功能重构；ChIP分析证实，p53能直接结合Lin54、Lin9、Mybl2和Rbl2的启动子区域，其结合强度高于WT及G5DM,提示其通过转录调控激活这些基因(P<0.05),同时p53S上调Cdc25c及CDK1/2/4/6等蛋白的表达，协同推动细胞周期进程(P<0.05);IF-FISH结果显示，p53S促进Recql4、Blm、Terf1和Pot1a与端粒DNA的共定位，并增强端粒信号强度(P<0.05),而G5DM及G5TKO细胞中ATR在端粒区异常聚集，表明p53S通过招募保护因子维持端粒完整性；端粒qPCR证实p53S可恢复端粒复制能力(P<0.05),提示其通过激活增殖通路与端粒保护机制协同促进细胞端粒的延伸。结论 p53S的引入可以上调DNA解旋酶、端粒保护蛋白并招募到端粒DNA,缓解WS所造成的端粒复制压力，有利于端粒的延伸。
2025年06期 v.50;No.297 781-791页 [查看摘要][在线阅读][下载 1731K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：113 ] - 邰诗蝶;廖佳佳;郭蝶;陈兴梅;张紫麒;付凌云;沈祥春;
目的 研究二甲双胍(metformin, Met)抑制血管内皮细胞衰老的作用与调控过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPAR-γ)信号的作用。方法 C57BL/6J小鼠采用高糖高脂饲养联合低剂量链脲佐菌素(STZ,30 mg/kg)建立2型糖尿病(diabetes mellitus, DM)小鼠，造模成功后将小鼠随机分为Control组、Model组、Met组(250 mg/kg),灌胃给药8周并监测空腹血糖(fasting blood glucose, FBG)的变化，给药结束后通过麻醉后取血及胸主动脉组织，通过试剂盒检测小鼠血清中甘油三酯(triglycerides, TG)、总胆固醇(total cholesterol, T-CHO)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol, LDL-C)以及高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol, HDL-C)的水平，ELISA检测小鼠血清中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平，Western blot检测小鼠胸主动脉PPAR-γ、P53以及P21蛋白的表达水平；体外实验采用高糖高脂(high glucose and high lipid, HG/PA)刺激人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells, HAECs)建立血管内皮细胞衰老模型，采用CCK8检测HAECs细胞活力，2′,7′-二氢二氯荧光素二乙酸酯(2′,7′-dihydrodichlorofluorescein diacetate, DCFH-DA)为荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平，ELISA检测细胞培养上清液中IL-6和TNF-α的分泌量，β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老水平，采用Met、PPAR-γ抑制剂GW9662或PPAR-γ激动剂罗格列酮作用HAECs后，通过Western blot检测PPAR-γ、P53以及P21蛋白的表达水平。结果 与Model组相比，Met组小鼠血清中FBG、TG、T-CHO和LDL-C水平降低(P<0.05),而HDL-C水平增加(P<0.05);ELISA结果显示，小鼠血清IL-6和TNF-α在Model组中增加(P<0.05),Met治疗后可逆转上述变化(P<0.05);Western blot结果显示，Model组小鼠胸主动脉中P53和P21蛋白表达水平升高(P<0.05),但PPAR-γ水平极低(P<0.05),Met给药后上述蛋白表达水平得到改善(P<0.05);CCK8结果显示，与Control组相比，HG/PA组中HAECs细胞活力降低(P<0.05),细胞内ROS水平增加(P<0.05),IL-6、TNF-α分泌量增加(P<0.05),衰老阳性细胞百分比增加(P<0.05);Met干预后能明显改善HG/PA诱导HAECs的上述变化(P<0.05),并且GW9662能逆转Met对PPAR-γ、P53以及P21蛋白表达的调控作用(P<0.05);而与罗格列酮组相比，Met组及Met与罗格列酮共孵育组对P53和P21蛋白的表达水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Met对DM相关血管内皮细胞衰老具有明显改善作用，其作用机制与调控PPAR-γ信号密切相关。
2025年06期 v.50;No.297 792-801+848页 [查看摘要][在线阅读][下载 1560K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：1 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：426 ] - 明倩;刘颖;敖春艳;刘艳;李昌哲;于春;赵华;李军;
目的 探讨组蛋白H3第9位赖氨酸二甲基化(H3K9me2)在银杏叶片对燃煤污染型砷中毒患者DNA损伤修复影响中的作用。方法 在贵州省筛选出102名地砷病患者，银杏叶片规范干预3个月，于干预前后采集患者外周血样；单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis, SCGE)法检测外周血细胞DNA损伤水平，实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reacton, qPCR)法检测外周血单核细胞组蛋白甲基转移酶G9a、去甲基化酶JHDM2A与DNA损伤修复基因mRNA水平，酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)法检测外周血单核细胞H3K9me2水平，分析不同程度组地砷病患者DNA损伤、DNA损伤修复基因转录、G9a与JHDM2A基因转录及H3K9me2修饰水平，并探究银杏叶片干预后上述指标变化情况及其关系。结果 地砷病患者外周血细胞DNA损伤表现随地砷病程度增加而加重；与轻度组及中度组相比，重度组地砷病患者彗星尾矩(Olivetailmoment, OTM)有所升高；与轻度组相比，重度组地砷病患者尾部DNA百分含量(TailDNA%)有所升高，(P<0.05);与轻度组相比，重度组地砷病患者DNA损伤修复基因MGMT、MPG、XRCC1 mRNA转录水平有所降低，中度组与重度组地砷病患者DNA损伤修复基因XPC mRNA转录水平有所降低(P<0.05);与轻度组相比，中度组与重度组地砷病患者H3K9me2修饰水平与G9a、JHDM2A mRNA转录水平均有所降低(P<0.05);与干预前相比，银杏叶片干预后，地砷病患者外周血细胞的细胞核较为清晰、核荧光强度增强、拖尾情况有所改善，患者OTM、TailDNA%明显降低(P<0.05),DNA损伤修复基因MGMT、PAPR1、MPG、XRCC1、XPC、DDB2与G9a基因mRNA水平、H3K9me2水平升高(P<0.05);银杏叶片干预前后，地砷病患者H3K9me2水平变化值与G9a、DNA损伤修复基因MGMT、MPG、DDB2基因mRNA水平变化值呈正相关关系(P<0.05),DNA损伤修复基因MGMT、XRCC1 mRNA水平变化值与OTM、TailDNA%变化值呈负相关关系(P<0.05)。结论 燃煤砷暴露可诱导地砷病患者DNA损伤、抑制DNA损伤修复基因MGMT、PARP1、MPG、XRCC1、XPC、DDB2 mRNA转录，抑制组蛋白甲基转移酶G9a mRNA转录及组蛋白H3K9me2总体修饰水平，银杏叶片可能通过增加组蛋白甲基转移酶G9a转录提高H3K9me2修饰水平与DNA损伤修复基因MGMT转录，从而改善燃煤砷暴露所致DNA损伤。
2025年06期 v.50;No.297 802-810页 [查看摘要][在线阅读][下载 1311K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：1 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：156 ] - 陈鑫;鲍海龙
;胡茜
;严菲
;夏桂玲
;黄程
;卢婷
;曹曌兴
;李伟
;陈章荣
;
目的 探讨2-氨基乙氧基二苯基硼酸盐(2-aminoethoxydiphenyl borate, 2-APB)对主动脉弓缩窄(transverse aortic constriction, TAC)心肌重构中心肌肥大(cardiac hypertrophy, CH)的影响和机制。方法 24只小鼠均分为假手术(Sham)组(只穿线但不结扎主动脉弓部)、TAC组(垫扎主动脉弓部)、TAC+溶剂(Veh)组(等体积二甲基亚砜)及TAC+2-APB组[腹腔注射1 mg/(kg·d) 2-APB];干预结束后2周，称取Sham组和TAC组小鼠体质量(BW),采用超声心动图检测麻醉状态下Sham组和TAC组小鼠的心功能指标[左心室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF)、左室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening, LVFS)、左室舒张末期内径(left ventricular internal diameter in diastole, LVIDd)及左室收缩末期内径(left ventricular internal diameter in systole, LVIDs)],麻醉处死Sham组和TAC组小鼠、取心脏称重计算心脏质量(heart weight, HW)与BW的比值(HW/BW),麻醉处死TAC+Veh组和TAC+2-APB组小鼠制作心肌组织切片，采用麦胚凝集素(wheat germ agglutinin, WGA)染色检测各组心肌细胞横截面积；取对数生长期的AC16细胞分为对照(Control)组(不给予任何处理)、血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ, AngⅡ)组(1μmol/L AngⅡ刺激24 h)及AngⅡ+2-APB组(1μmol/L AngⅡ和10μmol/L 2-APB同时刺激24 h);采用Western blot检测Sham组和TAC组小鼠心肌组织中动力蛋白相关蛋白1(dynamin-related protein 1, Drp1)、磷酸化Drp1(phospho-Drp1, p-Drp1)、β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy chain, β-MHC)、心房利钠肽(atrial natriuretic peptide, ANP)、视神经萎缩蛋白1(optic atrophy protein 1, Opa1)及线粒体融合蛋白2(mitofusin 2, Mfn2)蛋白的表达水平，检测TAC+Veh组、TAC+2-APB组小鼠心肌组织和上述各组AC16细胞中β-MHC、ANP蛋白的表达水平；采用免疫荧光染色检测Control组、AngⅡ组和AngⅡ+2-APB组AC16细胞中Actin和TOM20(translocase of outer mitochondrial membrane 20)蛋白的表达水平；采用JC-1染色检测Control组、AngⅡ组及AngⅡ+2-APB组AC16细胞线粒体膜电位情况；采用荧光探针检测Control组、AngⅡ组及AngⅡ+2-APB组AC16细胞的活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平。结果 与Sham组相比，TAC组小鼠的LVEF和LVFS均下降，LVIDd、LVIDs及HW/BW均升高(P<0.05),TAC组和TAC+Veh组小鼠心肌细胞横截面积增大(P<0.05),TAC+2-APB组小鼠心肌细胞横截面积较TAC+Veh组降低(P<0.05);Western blot结果显示，与Sham组相比，TAC组小鼠心肌组织的β-MHC、ANP、p-Drp1及p-Drp1/Drp1蛋白表达水平均升高(P<0.05),Opa1和Mfn2蛋白表达均降低(P<0.05);TAC+Veh组小鼠心肌组织的β-MHC、ANP蛋白表达水平较Sham组升高(P<0.05),TAC+2-APB组小鼠心肌组织的β-MHC、ANP蛋白表达水平较TAC+Veh组降低(P<0.05);与Control组相比，AngⅡ组AC16细胞中β-MHC、ANP蛋白表达水平均升高(P<0.05),AngⅡ+2-APB组AC16细胞中β-MHC、ANP蛋白表达水平较AngⅡ组降低(P<0.05);免疫荧光染色显示，与Control组相比，AngⅡ组AC16细胞明显肥大、线粒体分裂增加，AngⅡ+2-APB组AC16细胞较AngⅡ组心肌细胞肥大减轻、线粒体分裂降低；JC-1染色显示，AngⅡ组AC16细胞的线粒体膜电位较Control组降低(P<0.05),AngⅡ+2-APB组AC16细胞的线粒体膜电位较AngⅡ组得以改善(P<0.05);与Control组相比，AngⅡ组AC16细胞的ROS水平升高，AngⅡ+2-APB组AC16细胞的ROS水平较AngⅡ组降低(P<0.05)。结论 2-APB可改善TAC心肌重构中的CH,其机制可能与调节线粒体动力学相关。
2025年06期 v.50;No.297 811-821页 [查看摘要][在线阅读][下载 1951K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：98 ]
- 余稳;谈宝珍;侯亮;吴兴安;李秀琪;
目的 探索miR-27a-3p通过靶向同源结构域相互作用蛋白激酶2(homeodomain interacting protein kinase 2,HIPK2)对缺氧复氧(hypoxia reoxygenation, H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响。方法 使用H9c2细胞进行缺氧复氧处理，建立H/R模型，并分为H/R组、H/R+miR-NC组(转染miR-27a-3p阴性对照)、H/R+miR-27a-3p组(转染miR-27a-3p mimics)、H/R+miR-27a-3p+pcDNA-NC组(共转染miR-27a-3p和pcDNA-NC)、H/R+miR-27a-3p+pcDNA-HIPK2组(共转染miR-27a-3p和pcDNA-HIPK2),对照组为正常培养的细胞；各组转染48 h后进行H/R处理，噻唑蓝(MTT)法和EdU染色法检测各组细胞增殖情况；流式细胞术检测细胞凋亡率；单丹磺酰尸胺(MDC)染色法检测各组细胞自噬水平；酶联免疫吸附(ELISA)法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、肌酸激酶(creatine kinase, CK)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)水平；实时荧光定量反转录-聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测miR-27a-3p、HIPK2 mRNA表达水平；Western blot法检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2基因(B cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein, Bax)、HIPK2、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3Ⅱ,LC3-Ⅱ)及p62蛋白表达量；双荧光素酶报告实验验证miR-27a-3p与HIPK2靶向关系。结果 与对照组相比，H/R组H9c2细胞LDH、CK、TNF-α及IL-17水平、细胞凋亡率、自噬囊泡数及HIPK2 mRNA及HIPK2、Bax及LC3-Ⅱ蛋白表达量升高，而细胞活力、EdU阳性率、miR-27a-3p、Bcl-2及p62蛋白表达水平降低(P<0.05);过表达miR-27a-3p可降低细胞凋亡率、自噬囊泡数、HIPK2 mRNA、HIPK2、Bax及LC3-Ⅱ蛋白表达量、LDH、CK、TNF-α及IL-17水平，增加细胞活力、EdU阳性率、Bcl-2及p62蛋白表达量(P<0.05);过表达HIPK2可逆转过表达miR-27a-3p对H/R诱导的H9c2细胞损伤的保护作用(P<0.05);miR-27a-3p可靶向负调控HIPK2表达(P<0.05)。结论 miR-27a-3p可能通过靶向下调HIPK2减少H/R诱导的H9c2细胞中炎性细胞因子释放，抑制细胞凋亡和自噬，减轻细胞损伤。
2025年06期 v.50;No.297 822-830+839页 [查看摘要][在线阅读][下载 1730K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：88 ] - 关君艳;沈文婷;刘晓辉;薛娇;邴小三;
目的 探讨山柰酚(kaempferol, Kae)调控高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1 protein, HMGB1)/晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end products, RAGE)通路对哮喘(asthma, BA)小鼠气道炎症的影响。方法 将小鼠分为对照组(Control组)、BA组、Kae低剂量组(Kae-L组)、Kae高剂量组(Kae-H组)及Kae-H+rHMGB1组(重组蛋白rHMGB1);使用动物肺功能分析仪检测小鼠呼气流速(peak expiratory flow, PEF)和静息每分钟通气量(minute ventilation at rest, VE),采用全自动血液分析仪分析白细胞总数(leukocyte count, LEU)、嗜酸性粒细胞(eosinophil count, EOS)、淋巴细胞(lymphocyte count, LYM)及中性粒细胞(neutrophil count, NEU)等炎症细胞数量，使用酶联免疫吸附(ELISA)法检测干扰素-γ(interferon-gamma, IFN-γ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、IL-5、IL-13及IL-10水平；流式细胞仪检测Th17、Treg细胞比例和Thl、Th2细胞的百分比，并计算Th17/Treg值和Thl/Th2比值；观察肺组织形态和纤维化情况；Western Blot检测检测BCL2相关X蛋白(BCL2-associated X protein, Bax)、HMGB1、RAGE、核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、p-NF-κB蛋白表达。结果 与BA组相比，Kae-L组和Kae-H组小鼠肺组织和纤维化程度有所减轻，PEF和VE、IFN-γ和IL-10水平、Treg细胞比例、Th1细胞比例、Th1/Th2值、肺组织Bcl-2蛋白表达水平升高，肺泡灌洗液中LEU、EOS、LYM和NEU数量、IL-4、IL-5、IL-13水平、外周血中Th17比例、Th17/Treg值、Th2细胞比例、肺组织Bax、HMGB1、RAGE、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达水平降低(P<0.05);rHMGB1可逆转Kae对BA小鼠的改善作用(P<0.05)。结论 Kae可能通过抑制HMGB1-RAGE信号通路来调节BA小鼠免疫反应，降低炎症和肺组织损伤，改善肺功能。
2025年06期 v.50;No.297 831-839页 [查看摘要][在线阅读][下载 2133K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[下载次数：183 ] - 陈丹;王昕煜;江玲;唐萍;
目的 探究三七总皂苷对脑挫伤大鼠神经元凋亡的影响，分析其与腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)/过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator activated receptor gamma co-activator 1α, PGC1α)通路的调控机制。方法 从98只SD大鼠中随机选取16只为假手术组，剩余82只大鼠构建创伤性脑损伤(traumatic brain injury, TBI)模型，将模型建立成功的64只大鼠随机分为模型组、三七总皂苷组(26.25 mg/kg)、Compound C组(CC, AMPK抑制剂，0.25 mg/kg)和三七总皂苷+CC组(三七总皂苷26.25 mg/kg+CC 0.25 mg/kg),每组16只，造模后24 h进行药物处理，持续21 d;给药结束后，采用改良神经功能缺损评分(modified neurological deficit score, mNSS)量表评估各组大鼠神经功能；比色法检测各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和丙二醛(malondialdehyde, MDA)水平；苏木精伊红(hematoxylin eosin, HE)染色、βⅢ微管蛋白(neuron-specific classⅢbeta-tubulin, Tuj1)免疫荧光染色和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick-end labeling, TUNEL)染色分别显示大鼠脑组织病理变化、神经元以及细胞凋亡情况；Western blot检测脑组织p-AMPK/AMPK、PGC1α、天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3, caspase-3)和B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2, Bcl-2)蛋白表达。结果 与假手术组比较，模型组脑组织神经细胞明显变性，SOD活性、神经细胞数目、Bcl-2表达明显下降(P<0.05);mNSS评分、MDA含量、凋亡神经元数目、p-AMPK/AMPK、PGC1α、caspase-3表达显著升高(P<0.05);与模型组比较，三七总皂苷组大鼠脑组织神经细胞变性现象明显改善，SOD活性、神经细胞数目、p-AMPK/AMPK、PGC1α、Bcl-2表达明显上升，mNSS评分、MDA含量、凋亡神经元数目、caspase-3表达显著降低(P<0.05);CC能明显抑制AMPK/PGC1α信号通路，加重神经细胞损伤，减弱三七总皂苷对脑挫伤后神经损伤的保护作用。结论 三七总皂苷可能通过激活AMPK/PGC1α信号通路实现脑挫伤后的抗氧化、抗凋亡以及神经保护功能。
2025年06期 v.50;No.297 840-848页 [查看摘要][在线阅读][下载 1535K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：227 ] - 曾东扬;沈文婷;刘晓辉;薛娇;邴小三;关君艳;
目的 探讨长链非编码RNA(long non coding RNA,LncRNA)钾电压门控通道亚家族Q成员1反链/反义转录物1(potassium voltage-gated channel subfamily Q member 1 reverse/antisense transcript 1,KCNQ1OT1)靶向调控微小RNA-7-5p(microRNA-7-5p, miR-7-5p)对肾母细胞瘤(wilms tumor, WT)细胞迁移和侵袭的影响。方法 收集26例WT患儿术中切除的癌旁组织及WT组织，采用qRT-PCR法检测WT及癌旁组织中LncRNA KCNQ1OT1、miR-7-5p的表达；将WiT49细胞随机分为Control组(正常培养)、sh-NC(转染sh-NC)组、sh-KCNQ1OT1(转染sh-KCNQ1OT1)组、sh-KCNQ1OT1+anti-NC(转染sh-KCNQ1OT1+anti-NC)组及sh-KCNQ1OT1+anti-miR-7-5p(转染sh-KCNQ1OT1+anti-miR-7-5p)组；24 h后采用qRT-PCR测定各组WiT49细胞中LncRNA KCNQ1OT1、miR-7-5p表达，CCK8和平板克隆法检测WiT49细胞增殖能力，划痕实验检测WiT49细胞迁移能力，Transwell实验检测WiT49细胞侵袭能力，Western blot检测WiT49细胞中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)-2、MMP-9蛋白的表达。结果 WT组织LncRNA KCNQ1OT1 mRNA表达高于癌旁组织，miR-7-5p表达低于癌旁组织(P<0.05);与sh-NC组和Control组比较，sh-KCNQ1OT1组细胞增值的A_(450)值、克隆数、划痕愈合率、侵袭数、LncRNA KCNQ1OT1、MMP-2及MMP-9表达下降，miR-7-5p表达增高(P<0.05);与sh-KCNQ1OT1组和sh-KCNQ1OT1+anti-NC组比较，sh-KCNQ1OT1+anti-miR-7-5p组细胞增殖的A_(450)值、克隆数、划痕愈合率、侵袭数及MMP-2、MMP-9表达升高，miR-7-5p表达下降(P<0.05)。结论 敲低LncRNA KCNQ1OT1通过靶向调控miR-7-5p抑制WT细胞的迁移和侵袭。
2025年06期 v.50;No.297 849-856页 [查看摘要][在线阅读][下载 1538K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：77 ] - 李志刚;李剑波;张云;郭普;李娟;孙绍裘;
目的 探讨膝痹疏通汤通过调控Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路抑制膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)大鼠软骨细胞凋亡的机制。方法 采用手术法建立大鼠前后交叉韧带切断术模型，将60只雄性大鼠随机分为假手术组(仅做皮肤切开术)、模型组(手术诱导KOA)、膝痹疏通汤低剂量组(1 g/kg,灌胃)、膝痹疏通汤中剂量组(2 g/kg,灌胃)、膝痹疏通汤高剂量组(4 g/kg,灌胃)及盐酸氨基葡萄糖组(1 000 mg/kg,灌胃),每组10只；56 d后对各组大鼠行奎森功能障碍指数(lequesne, MG)评分，观察大鼠的行为学变化；采用HE染色行膝关节软骨组织病理组织学分析并评分；酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)试剂盒检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)因子表达水平；TUNEL染色观察软骨细胞凋亡情况；Western blotting检测软骨细胞凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、BCL2关联X蛋白(Bax)和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Wnt、Wnt3a、β-catenin表达。结果 与假手术组比较，模型组大鼠Lequesne MG评分、组织病理学评分、TNF-α、IL-1β、IL-6、软骨细胞凋亡比例、Caspase-3、Bax、Wnt、Wnt3a显著升高(P<0.05),Bcl-2、p-β-catenin显著降低(P<0.05);与模型组比较，膝痹疏通汤中、高剂量组和盐酸氨基葡萄糖组Lequesne MG评分、组织病理学评分、TNF-α、IL-1β、IL-6、软骨细胞凋亡比例、Caspase-3、Bax、Wnt、Wnt3a显著降低(P<0.05),Bcl-2、p-β-catenin显著增加(P<0.05);与膝痹疏通汤低剂量组比较，膝痹疏通汤中、高剂量组和盐酸氨基葡萄糖组Lequesne MG评分、组织病理学评分、TNF-α、IL-1β、IL-6、软骨细胞凋亡比例、Caspase-3、Bax、Wnt、Wnt3a显著降低(P<0.05),Bcl-2、p-β-catenin显著增加(P<0.05);与膝痹疏通汤中剂量组和盐酸氨基葡萄糖组比较，膝痹疏通汤高剂量组Lequesne MG评分、组织病理学评分、TNF-α、IL-1β、IL-6、软骨细胞凋亡比例、Caspase-3、Bax、Wnt、Wnt3a显著降低(P<0.05),Bcl-2、p-β-catenin显著增加(P<0.05)。结论 膝痹疏通汤能够改善KOA大鼠炎症反应和软骨细胞凋亡，其机制可能涉及对Wnt/β-catenin信号通路的调节。
2025年06期 v.50;No.297 857-865页 [查看摘要][在线阅读][下载 1675K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：222 ] - 李帅;葛新苗;温美侠;刁丛;高倩;方菲;王东海;
目的 探讨扁蒴藤素是否调控circANKS1B/miR-485-5p途径对宫颈癌细胞生物学行为的影响。方法 将宫颈癌细胞SiHa分为对照组、扁蒴藤素(低、中、高)组、si-circANKS1B组、si-NC组、miR-NC组、miR-485-5p mimic组、扁蒴藤素+pcDNA-circANKS1B1组及扁蒴藤素+miR-485-5p inhibitor组进行细胞培养；应用CCK-8法检测SiHa细胞增殖抑制率，集落形成实验检测集落形成数，流式细胞术检测凋亡率、transwell实验检测细胞迁移数；采用RT-qPCR分析circANKS1B和miR-485-5p表达水平；双荧光素酶报告实验确定circANKS1B和miR-485-5p靶向关系。结果 与对照组比较，扁蒴藤素(低、中、高)组SiHa细胞凋亡率、抑制率、miR-485-5p表达升高，迁移细胞数、集落形成数、circANKS1B表达降低(P<0.05);与si-NC组比较，si-circANKS1B组SiHa细胞凋亡率、抑制率、miR-485-5p表达升高，迁移细胞数、集落形成数降低(P<0.05);与miR-NC组比较，miR-485-5p mimic组SiHa细胞抑制率、凋亡率升高，集落形成数、迁移细胞数降低(P<0.05);circANKS1B与miR-485-5p靶向结合；与扁蒴藤素组比较，扁蒴藤素+pcDNA-circANKS1B1组、扁蒴藤素+miR-485-5p inhibitor组SiHa细胞凋亡率、抑制率降低，迁移细胞数、集落形成数升高(P<0.05)。结论 扁蒴藤素通过抑制circANKS1B/miR-485-5p途径对宫颈癌细胞具有抗增殖、抗迁移和抗侵袭作用。
2025年06期 v.50;No.297 866-874页 [查看摘要][在线阅读][下载 2303K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：46 ] - 杜鹃;刘媛;杨倩;常瑚;高歌;
目的 探讨牛磺熊去氧胆酸(tauroursodeoxycholic acid, TUDCA)通过转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β1)/Smad家族成员3(Smad family member 3)信号通路对高糖(high glucose, HG)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)损伤的影响。方法 以HUVECs细胞为研究对象，将其分为Control组(正常培养)、HG组(50 mmol/L HG诱导细胞24 h)、L-TUDCA、M-TUDCA、H-TUDCA组(在HG诱导的基础上添加1、10、100μmol/L的TUDCA)、TUDCA+SRI-011381组(在H-TUDCA组的基础上添加10μmol/L SRI-011381);MTT法和平板克隆实验检测处理24 h的HUVECs增殖；划痕实验检测处理24 h的HUVECs迁移；流式细胞仪检测处理24 h的HUVECs细胞凋亡；WB检测处理24 h的HUVECs中内皮细胞标记分子(VE-cadherin、CD31)、间质细胞标记分子(FSP-1、α-SMA)和TGF-β1/Smad3信号通路蛋白表达。结果 与Control组比较，HG组存活率、克隆数、划痕愈合率、VE-cadherin、CD31蛋白表达降低，凋亡率、FSP-1、α-SMA、TGF-β1、Smad3蛋白表达升高(P<0.05);与HG组比较，L-TUDCA组、M-TUDCA组、H-TUDCA组存活率、克隆数、划痕愈合率、VE-cadherin、CD31蛋白表达升高，凋亡率、FSP-1、α-SMA、TGF-β1、Smad3蛋白表达降低(P<0.05);与H-TUDCA组比较，TUDCA+SRI-011381组存活率、克隆数、划痕愈合率、VE-cadherin、CD31蛋白表达降低，凋亡率、FSP-1、α-SMA、TGF-β1、Smad3蛋白表达升高(P<0.05)。结论 TUDCA可以抑制HG诱导的HUVECs损伤，其机制可能是抑制TGF-β1/Smad3信号通路实现的。
2025年06期 v.50;No.297 875-882页 [查看摘要][在线阅读][下载 1643K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：176 ] - 郭会敏;安静霞;李辉;
目的 基于磷酸肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路探讨血府逐瘀胶囊(XFZYC)对大鼠经皮颈动脉介入治疗(PCI)术后血管再狭窄及血小板聚集的影响。方法 将48只大鼠分为假手术组、模型组、XFZYC组、XFZYC+740Y-P(PI3K激活剂)组，每组12只，除假手术组仅结扎左颈总动脉，其余组均利用球囊损伤颈动脉建立再狭窄模型大鼠；给药4周后，进行超声心动图颈动脉检测和血小板聚集实验，并采用Elisa法检测大鼠血清血小板生成素(thrombopoietin, TPO)水平，HE染色进行颈动脉形态学分析，免疫组织化学染色检测颈动脉中骨桥蛋白(osteopontin, OPN)、α-平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin, α-SMA)表达，Western blot检测血液和颈动脉中PI3K、AKT、mTOR相关蛋白表达。结果 与假手术组比较，模型组大鼠颈动脉壁增厚、内径缩小、血管腔变窄，OPN阳性面积增加，α-SMA阳性面积减少，PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较，XFZYC组大鼠颈动脉壁变薄，内径增加，血管腔变宽，血清TPO水平和血小板聚集率降低，OPN阳性面积减少，α-SMA阳性面积增加，PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达降低(P<0.05);与XFZYC组相比，XFZYC+740Y-P组大鼠颈动脉壁加厚，内径减少，血管腔变窄，血清TPO水平和血小板聚集率升高，OPN阳性面积增加，α-SMA阳性面积减少，PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达提高(P<0.05)。结论 XFZYC可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路抑制大鼠颈动脉PCI术后血管再狭窄及血小板聚集。
2025年06期 v.50;No.297 883-890页 [查看摘要][在线阅读][下载 1526K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：174 ]
- 杨浩;王玉峰;郝成;赵旺;杨磊落;
目的 探索手术治疗后无影像学异常颈脊髓损伤(cervical spinal cord injury without radiographic abnormality, CSCIWORA)不良预后的危险因素，绘制列线图预测患者预后并对模型进行验证。方法 根据美国脊髓损伤协会(American spinal injury association, ASIA)评分在治疗前后有、无提升，将81例CSCIWORA患者具有完整病历记录的患者分为功能改善组(n=56)和非功能改善组(n=25);收集患者的影像学资料、神经功能评分及一般临床资料等，采用单因素和多因素logistic回归分析，确定术后CSCIWORA不良预后的独立危险因素；根据多因素回归分析的独立预测因子，绘制基于logistic回归系数的可视化列线图，量化各因素对不良预后风险的贡献权重并用ROC曲线对预测模型进行性能评估。结果 颈髓水肿程度、颈髓损伤MRI范围、手术前日本骨科协会(Japanese orthopaedic association, JOA)评分、术前激素使用时间是CSCIWORA患者术后神经功能改善不良的独立危险因素(P<0.05),ROC曲线下的面积(area under curve,AUC)分别为0.910(手术前JOA评分<11.5分)、0.680(术前激素使用时间>1.5 d)、0.630(颈髓损伤MRI范围分级≥2级)、0.803(颈髓水肿程度>24.5 mm);绘制CSCIWORA患者不良预后的列线图(C指数=0.973),验证列线图的ROC曲线，AUC=0.973(95%CI为0.875～1.000)。结论 手术前JOA评分<11.5分、颈髓损伤MRI范围分级≥2级、颈髓水肿程度>24.5 mm和术前激素使用时间>1.5 d是CSCIWORA患者预后不良的独立危险因素，列线图预测性能良好，可用于CSCIWORA患者手术后预后评估。
2025年06期 v.50;No.297 891-896+902页 [查看摘要][在线阅读][下载 1212K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：61 ] - 罗璐灵;刘富亿;王坤利;朱利红;胡系伟;
目的 探讨外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophils/lymphocytes ratio, NLR)、红细胞宽度(red blood cell distribution width, RDW)、胱抑素C(cystatin C,Cys-C)与慢性阻塞性肺疾病急性加重期(acute chronic obstructive pulmonary disease, AECOPD)合并肺动脉高压(pulmonary hypertension, PH)的相关性。方法 收集贵州医科大学附属医院呼吸与危重症医学科220例AECOPD患者资料，根据肺动脉收缩压(systolic pulmonary artery pressure, SPAP),将99例AECOPD-PH患者设为观察组，121例AECOPD-非PH患者设为对照组；采用Mann-Whitney U检验分析两组患者的NLR、RDW、Cys-C及相关临床指标；釆用logistic回归筛选AECOPD合并PH的危险因素，Spearman分析各指标与肺动脉收缩压严重程度的相关性，绘制ROC曲线，通过线下面积(area under curve,AUC)评价NLR、RDW及Cys-C单独或联合预测AECOPD继发PH的临床价值。结果 NLR、RDW、动脉血二氧化碳分压、右室内径、肺动脉直径与SPAP呈正相关，动脉血酸碱值与SPAP呈负相关；在单一指标检测中NLR预测PH能力明显优于RDW及Cys-C,但三者联合评估较单一及两两检测能更好地预测PH。结论 NLR、RDW可反映AECOPD合并PH的严重程度，NLR、RDW及Cys-C三者联合评估对AECOPD合并PH具有一定临床预测价值。
2025年06期 v.50;No.297 897-902页 [查看摘要][在线阅读][下载 1073K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：132 ] - 罗娟;刘隽;黄磊;张云菊;王云;周谊霞;
目的 探讨非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)住院患者焦虑、抑郁与照顾者负担的相关性，并分析照顾者负担的影响因素。方法 采用一般资料调查表，广泛性焦虑量表(generalized anxiety disorder, GAD-7)、病人健康抑郁问卷量表(patient health questionnaire-9,PHQ-9)及照顾者负担量表(zarit caregiver burden interview, ZBI)进行问卷调查，对NAFLD住院患者及其照顾者各145名进行焦虑、抑郁及照顾者负担等相关测评，分析患者焦虑、抑郁情况及其与照顾者负担的关系。结果 NAFLD住院患者焦虑、抑郁与照顾者负担均呈正相关(r=0.311、0.306,P<0.01);二分类logistic回归分析显示，患者婚姻情况中已婚、离婚，是否合并慢性病及照顾者是否单独照顾患者、有无娱乐活动是照顾者负担的独立危险因素。结论 NAFLD住院患者焦虑、抑郁与照顾者负担存在正相关关系，患者及照顾者因素均可影响照顾者负担。
2025年06期 v.50;No.297 903-908页 [查看摘要][在线阅读][下载 1042K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：133 ] - 罗微;张祖隆;雷毅;
目的 探讨终末期肾病(end stage renal disease, ESRD)患者长期行维持性血液透析(maintenance hemodialysis, MHD)出现营养不良并发症相关的危险因素。方法 选取贵州医科大学附属医院194例规律行MHD的ESRD患者为研究对象，利用改良定量主观整体评估表对MHD的ESRD患者营养状况进行评估，分为营养正常组(n=112)和营养不良组(n=82),采用χ~2、t、U检验比较两组MHD的ESRD患者的一般临床资料、人体学、人体成分测量及血液等各项指标，对差异有统计学意义的指标进行多因素logistic回归分析，并用ROC曲线评估MHD的ESRD患者营养不良影响因素的预测效能。结果 行MHD的ESRD患者营养不良率为42.2%,处于较高水平；营养不良组与营养正常组患者在性别、透析龄、年龄、上臂围、皮褶厚度、上臂肌围、肌肉力量、血压、去脂体脂率(fat-free mass, FFM)、骨骼肌质量指数(SMI)、肌肉组织指数(lean tissue index, LTI)、体内总水分(total body wate, TBW)、细胞外水分(extracellular body water, ECW)、细胞内水分(intracellular body water, ICW)、肌肉组织量(lean tissue mass, LTM)、体细胞质量(body cell mass, BCM)、体质量指数(body mass index, BMI)、甘油三酯、高密度脂蛋白、血红蛋白、血钾、C反应蛋白等方面比较，差异具有统计学意义(P<0.05)。logistic回归分析结果显示透析龄、年龄、C反应蛋白为行MHD的ESRD患者出现营养不良并发症的危险因素(P<0.05),ROC曲线AUC分别为0.649、0.618、0.714;BMI、SMI、LTM、皮褶厚度能较好的反映患者的营养状态(P<0.05),ROC曲线AUC分别为0.728、0.793、0.711、0.640。结论 透析龄长、年龄大、C反应蛋白水平高的规律行MHD的ESRD患者更易发生营养不良，定期监测BMI、SMI、皮褶厚度、LTM水平可以评估其营养状况，及时发现及防治营养不良的发生。
2025年06期 v.50;No.297 909-916页 [查看摘要][在线阅读][下载 1200K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：269 ] - 高鑫;刘小玲;尹毅丹;李娜;耿琳;
目的 探讨丁苯酞联合阿替普酶静脉溶栓治疗缺血性脑卒中患者的效果。方法 104例接受治疗的缺血性脑卒中患者随机均分为阿替普酶组和阿替普酶联合丁苯酞组，治疗2周，收集2组缺血性脑卒中患者的一般资料(性别、年龄、病程、病情程度、病灶部位及基础疾病);抽取2组缺血性脑卒中患者治疗前后的外周静脉血，采用多普勒超声检测仪检测两侧颈动脉的脑血流动力学指标(平均血流速度、动态阻力及外周阻力),采用全自动血气分析仪检测血液流变学指标(红细胞比容、血浆黏度及全血高切黏度),采用酶联免疫吸附法检测血管内皮功能[血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、一氧化氮(nitric oxide, NO)及内皮素-1(endothelin-1,ET-1)]、神经营养因子水平[胶质细胞源性神经营养因子(glial cell linederived neurotrophic factor, GDNF)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)及神经生长因子(nerve growth factor, NGF)]、氧化应激指标[丙二醇(malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)及谷胱甘肽(glutathione, GSH)]及炎性因子水平[C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、白细胞介秦6(interleukin-6,IL-6)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha, TNF-α)];采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、改良Rankin量表mRS)和Barthel指数(barthel index, BI)评估2组缺血性脑卒中患者治疗前后的神经功能和生活质量。结果 阿替普酶联合丁苯酞组患者治疗后的红细胞比容、血浆黏度、全血高切黏度、动态阻力、外周阻力、ET-1、MDA、炎性因子、NIHSS及mRS分数低于阿替普酶组，平均血流速度、VEGF、NO、神经营养因子、SOD、GSH、BI指数高于阿替普酶组，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 与单纯阿替普酶静脉溶栓相比，丁苯酞联合阿替普酶静脉溶栓治疗缺血性脑卒中患者可提高治疗效果。
2025年06期 v.50;No.297 917-923页 [查看摘要][在线阅读][下载 1083K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[下载次数：92 ] - 田世维;梅思思;杨宇石;段彦林;金柔;周增贵;秦田;杨冰清;尹明英;徐澍;
目的 探讨乳腺癌中SIRT2和c-Myc蛋白表达之间的相互关系及与临床病理特征的关系。方法 385例乳腺癌患者作为乳腺癌组，36例乳腺纤维腺病患者作为对照组，采用免疫组化EnVision二步法检测两组患者乳腺病变组织中SIRT2和c-Myc蛋白的表达，收集乳腺癌组患者相关临床病理特征资料(年龄、肿瘤大小、组织学分级、分子分型、TNM分期、淋巴结转移、复发与远处转移及死亡情况),分析SIRT2和c-Myc蛋白在乳腺癌组中的表达及与临床病理特征的相关性。结果 乳腺癌组中SIRT2和c-Myc阳性率均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);乳腺癌组患者的SIRT2和c-Myc蛋白表达情况在组织学分级，分子分型的比较，SIRT2蛋白表达在TNM分期，有无淋巴结转移情况的比较，差异有统计学意义(P<0.05),SIRT2和c-Myc蛋白在年龄、肿瘤大小、复发与远处转移及死亡情况中的比较，差异无统计学意义(P>0.05);乳腺癌组患者SIRT2与c-Myc蛋白呈正相关(r=0.155,P<0.001)。结论 乳腺癌组织中SIRT2和c-Myc蛋白表达上调，且与乳腺癌(组织学分级、分子分型、TNM分期等)临床病理特征正相关；SIRT2和c-Myc蛋白可能成为乳腺癌潜在预测标志物和治疗的靶点。
2025年06期 v.50;No.297 924-930页 [查看摘要][在线阅读][下载 1291K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：80 ]