研究生专栏

  • 长波紫外线对人黑素瘤细胞中视蛋白3的表达及细胞增殖的影响

    张玉蕾;曾雯;张伟;董仙;冯江龙;靳姝琦;罗欢欢;刘婷;陆洪光;

    目的 研究长波紫外线对人黑素瘤细胞中视蛋白3(OPN3)的表达及对细胞增殖的影响。方法 利用不同剂量的UVA分别照射人黑素瘤细胞系(A375细胞和MV3细胞)后,通过5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)实验及细胞增殖与活性检测试剂(CCK-8)检测照射前后细胞的增殖情况,实时荧光定量(RT-qPCR)分别检测细胞中视蛋白(OPN)的mRNA表达水平;利用慢病毒技术分别沉默和过表达A375细胞和MV3细胞中的OPN3,采用EdU实验及CCK-8方法检测细胞的增殖水平;沉默A375细胞和MV3细胞中OPN3后进行UVA照射,通过EdU及CCK-8方法检测照射前后细胞增殖的变化;采用转录组测序技术检测过表达及沉默OPN3的MV3细胞中差异基因的表达,并进行KEGG富集相关信号通路分析,免疫印迹法(Western blot)验证Hippo信号通路相关蛋白的表达情况。结果 与Control组相比,UVA照射组中的细胞增殖能力明显增强(P<0.05);RT-qPCR结果显示,OPN1、OPN2、OPN3、OPN4以及OPN5在A375和MV3细胞中均有表达,其中OPN3的转录表达水平水平均明显高于其他OPN(P<0.05);UVA照射组中A375和MV3细胞OPN3蛋白表达水平明显升高,沉默OPN3的表达后,A375和MV3细胞的增殖能力减弱,过表达OPN3后A375和MV3细胞的增殖能力增强(P<0.05);沉默人黑素瘤细胞(A375细胞和MV3细胞)OPN3后经UVA照射,细胞增殖能力较单纯照射UVA时降低(P<0.05);沉默及过表达MV3细胞中OPN3的表达后,RNA-seq测序结果筛选出141个差异基因,KEGG分析筛选差异基因富集信号通路9条,其中-Log10(FDR)值最高的为Hippo信号通路;沉默OPN3后,检测到LATS1表达水平增加,p-YAP、YAP、RhoA蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论 UVA可促进人黑素瘤细胞系(A375细胞和MV3细胞)OPN3的表达,并通过Hippo信号通路调控细胞的增殖过程。

    2024年01期 v.49;No.280 1-13页 [查看摘要][在线阅读][下载 2152K]
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  • 自噬对锌指转录因子1及高糖诱导的肾小管EMT的影响

    安小敏;李清璇;王彤;龙天华;杨鹏;卢雨微;张小龙;郭兵;石明隽;

    目的 探讨自噬是否可以通过调控锌指转录因子1(Snail1)的降解而影响肾小管上皮细胞-间充质转化(EMT)过程。方法 12只清洁级雄性SD大鼠,随机分为正常(NC)组、糖尿病(DM)组,予链脲佐菌素(STZ)53 mg/kg尾静脉注射复制大鼠Ⅰ型糖尿病模型;造模成功后第24周末处死NC和DM组大鼠,检测大鼠血糖、血尿素氮(BUN)和24 h尿白蛋白(24 hUAlb),Western blot检测肾组织自噬相关分子[自噬基因BECN 1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ/Ⅰ)、自噬降解底物蛋白1(p62)]、Snail1蛋白的表达水平;将大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)分为正常糖组(NG组)、高糖组(HG组)及高渗组(HM组),HG组培养的NRK-52E细胞在分为全蛋白组(Input组)和IP组[IP组又为阴性对照(IgG组)和实验组(Snail1/P62)];在高糖培养的NRK-52E细胞中分别使用自噬激动剂[雷帕霉素(RAP)和自噬抑制剂氯喹(CQ)]处理48 h,分为NG组、HG组、HG+RAP组及HG+CQ组,采用双标荧光腺病毒观察各组细胞的自噬流的情况,免疫荧光化学染色和免疫共沉淀观察Snail1与p62的蛋白相互作用,Western blot检测各组NRK-52E细胞中自噬相关分子、EMT、细胞外基质(ECM)指标表达变化;用二甲基亚砜(DMSO)、RAP、CQ处理NRK-52E细胞48 h,再联合放线菌酮(CHX)和蛋白酶抑制剂(MG-132)处理0、6及10 h,分为HG+DMSO/RAP组、HG+DMSO/CQ组,采用Western blot检测自噬对Snail1蛋白衰减的调控作用。结果 与NC组相比,DM组大鼠血糖、BUN及24 hUAlb均增高(P<0.05);Western blot结果显示,与NC组比较,DM组大鼠肾组织及高糖培养的NRK-52E细胞中Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达下调(P<0.05),p62、Snail1蛋白表达上调(P<0.05);双标腺病毒实验显示,在高糖刺激的NRK-52E中自噬流受阻,与HG组相比,HG+RAP组NRK-52E细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)的蛋白表达增多,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原蛋白Ⅲ(Col-Ⅲ)的蛋白表达减少(P<0.05),而HG+CQ组结果相反;免疫共沉淀实验发现Snail1与p62存在蛋白互作;联合CHX和MG-132后,HG+DMSO/RAP组中Snail1蛋白衰减速度加快。结论 在DM大鼠肾组织和高糖培养的肾小管上皮细胞中,自噬受抑后使Snail1通过自噬降解减少,诱导EMT及ECM沉积增多,促进了肾脏纤维化的发生。

    2024年01期 v.49;No.280 14-24页 [查看摘要][在线阅读][下载 1858K]
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基础研究

  • M1巨噬细胞培养液对ER阳性乳腺癌细胞上皮-间质转换的影响及Calpain的介导作用

    詹云惠;金爱;王旭东;

    目的 探讨M1巨噬细胞对乳腺癌细胞上皮细胞-间充质转换(EMT)的影响及钙蛋白酶(Calpain)在其中的介导作用。方法 以人乳腺癌细胞系雌激素受体阳性(ER+)细胞MCF-7、T47D及雌激素受体阴性(ER-)细胞MDA-MB-231为模型细胞,实验分为MCF-7细胞及T47D细胞的RPMI-1640组(RPMI-1640纯培养基培养)、M1巨噬细胞条件培养液培养组(M1-CM组)、M1-CM+Calp组[M1-CM联合Calpain抑制剂Calpeptin(50μmoL/L)处理]、M1-CM+CI-Ⅲ组[M1-CM联合Calpain抑制剂Calpain inhibitorⅢ(50μmoL/L)处理],MDA-MB-231细胞的RPMI-1640组、M1-CM组;采用划痕实验和侵袭实验检测各组中MCF-7细胞、T47D细胞、MDA-MB-231细胞的迁移能力及MCF-7细胞的侵袭能力,采用qRT-PCR检测M0巨噬细胞、M1巨噬细胞趋化因子受体7CCR7、趋化因子配体10(CXCL10)及白细胞介素-12(IL-12) mRNA表达水平,采用Western blot实验检测MCF-7细胞、T47D细胞及MDA-MB-231细胞中上皮-钙黏素(E-cad)、纤连蛋白(FN)、波形蛋白(Vim)蛋白水平表达。结果 与RPMI-1640组相比,M1-CM组ER+细胞MCF-7及T47D迁移能力增强(P<0.05),MCF-7细胞侵袭能力增强(P<0.05);ER+细胞MCF-7及T47D E-cad蛋白表达水平下调,而FN、Vim表达上调(P<0.05),而ER-细胞MDA-MB-231中只有E-cad表达上调(P<0.05);与M1-CM组相比,ER+细胞MCF-7及T47D的M1-CM+Calp组、M1-CM+CI-Ⅲ组中M1-CM诱导的ER+乳腺癌细胞EMT效应被逆转(P<0.05)。结论 M1巨噬细胞条件培养液可以促进ER+细胞人乳腺细胞的EMT,但对ER-细胞EMT无明显影响,其促进ER+乳腺癌细胞EMT信号机制可能与Calpain通路有关。

    2024年01期 v.49;No.280 25-33页 [查看摘要][在线阅读][下载 1664K]
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  • 发育性内皮基因座-1在人冠状动脉粥样硬化斑块中的表达及其与冠心病的关系

    路艳林;周明;李曼;彭进;戴佳琳;丁九阳;万昌武;汪家文;王杰;夏冰;

    目的 检测发育性内皮基因座-1(DEL-1)在人冠状动脉粥样硬化斑块中的表达,探讨其参与冠心病(CHD)发生发展的相关机制。方法 将58例人冠状动脉标本分为CHD组(25例)和对照组(CON组,33例),以左前降支作为研究对象;通过HE染色检测冠状动脉内膜厚度、纤维帽厚度、管腔狭窄程度评价冠状动脉结构改变;Western blot法检测冠状动脉内DEL-1、白细胞介素-17(IL-17)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(p-GSK-3β)及CCAAT增强结合蛋白β(C/EBPβ)的表达水平;免疫组织化学染色方法检测DEL-1、GSK-3β、C/EBPβ及IL-17在动脉粥样硬化斑块内的细胞分布及表达水平;Pearson积矩相关系数检验分析DEL-1表达水平与冠状动脉形态结构变化之间的相关性。结果 HE结果显示,与CON组相比,CHD组血管内膜增厚、管腔狭窄程度增大、纤维帽厚度变薄(P<0.05);免疫组织化学染色显示,CHD组中DEL-1主要表达在斑块内泡沫细胞胞质及胞核,而IL-17、GSK-3β及C/EBPβ主要在胞质中表达;Western blot结果显示,与CON组比较,CHD组中DEL-1、IL-17、GSK-3β、p-GSK-3β、C/EBPβ表达水平升高(P<0.05);Pearson积矩相关系数结果显示,DEL-1的蛋白表达水平与血管内膜厚度、管腔狭窄程度呈正相关(r=0.693、0.733,P<0.05),与纤维帽厚度呈负相关(r=-0.432,P<0.05)。结论 DEL-1在人动脉粥样硬化斑块内表达增加,其可能通过GSK-3β/C-EBPβ通路调节斑块内炎症反应,从而参与CHD的发生发展。

    2024年01期 v.49;No.280 34-40页 [查看摘要][在线阅读][下载 1499K]
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  • 14种喀斯特地区植物药提取物的体外抗氧化活性比较

    邹健;邓婕;王道平;吴昌学;曾晓晓;向洁;冉龙艳;肖霄;喻彦龙;官志忠;

    目的 对14种喀斯特地区特色植物药抗氧化活性进行筛选,为氧化应激诱导的相关疾病药物干预提供基础数据。方法 构建抗氧化测定体系(清除羟自由基能力的测定、清除2,2-联苯基-1-苦基肼基(DPPH)自由基能力的测定、铁氰化钾还原能力的测定及抑制脂质过氧化能力测定),以维生素C作为阳性对照,检测14植物药醇提取物的体外抗氧化活性,采用隶属函数分析法进行结果的综合评价及排序。结果 植物药对羟自由基的清除能力强弱为仙桃草、瓜子金>凉粉柴>天冬>锦茵陈>维生素C>其余药物;植物药对DPPH自由基的清除能力强弱为维生素C>锁阳>吴茱萸>响铃草>皂角>薏苡仁>仙桃草>其余药物;植物药还原能力的强弱为吴茱萸、仙桃草、锁阳、锦茵陈和菟丝子的还原能力比阳性对照组强,响铃草和皂角的还原能力与对照组相近,其余药物弱于对照组;植物药抑制脂质过氧化能力强弱为凉粉柴>仙桃草>响铃草>吴茱萸>菟丝子>玉竹>瓜子金>天冬>维生素C>其余药物;最后通过隶属函数分析显示,14种植物药的抗氧化能力为仙桃草>吴茱萸>维生素C>凉粉柴>响铃草>锁阳>天冬>皂角>瓜子金>薏苡仁>菟丝子>锦茵陈>黄精>一朵云>玉竹。结论 所检测的植物药中,仙桃草可能作为潜在的抗氧化应激候选药物;采用抗氧化评价体系结合隶属函数分析,更加科学可靠地评价了药物的抗氧化能力。

    2024年01期 v.49;No.280 41-47页 [查看摘要][在线阅读][下载 1239K]
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  • 体外冲击波疗法对膝关节骨性关节炎大鼠滑膜和软骨组织炎症因子的影响及机制

    杨兴月;黄圆月;安松松;毛冬梅;黄媛馨;杨俊龙;于子龙;秦乐;王林;沃春新;

    目的 探讨体外冲击波疗法(ESWT)对膝关节骨性关节炎(KOA)大鼠滑膜及软骨组织炎症因子的影响及机制。方法 30只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠随机均分为对照组、模型组及冲击波组,对照组大鼠右侧关节腔注射50μL生理盐水,模型组与冲击波组大鼠右侧膝关节腔注射碘乙酸钠(MIA)2 mg/50μL构建KOA模型,均干预14 d;干预结束后对照组、模型组大鼠行冲击波声音刺激,冲击波组大鼠予ESWT治疗,1次/周、共4周;分别于术前和术后第3、7、14、21、28、35及42天,采用热刺痛仪和足底刺痛仪检测各组大鼠右后爪的热缩爪潜伏期(PWTL)和足底机械刺激缩足阈值(MWT);术后第42天,各组大鼠给予10%水合氯醛腹腔注射麻醉,行右膝关节X线检查,然后处死、取右侧膝关节,采用免疫组织化学法(IHC)检测各组大鼠膝关节滑膜和软骨组织白细胞介素-1β (IL-1β)、IL-6及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。结果 模型组和冲击波组大鼠术后第3~42天的PWTL均较对照组缩短(P<0.05),冲击波组大鼠术后第28~42天的PWTL较模型组延长(P<0.05);模型组与冲击波组大鼠术后第3~42天的MWT均较对照组降低(P<0.05),冲击波组大鼠术后第21~42天MWT较模型组升高(P<0.05);与对照组比较,模型组与冲击波组大鼠关节间隙变窄,关节面粗糙变形程度较重,膝关节对线不齐,关节边缘有骨赘形成,且冲击波组上述X线表现轻于模型组;3组大鼠膝关节滑膜组织、软骨组织TNF-α、IL-1β及IL-6水平比较,对照组<冲击波组<模型组(P<0.05)。结论 ESWT可缓解KOA大鼠痛觉敏化症状及KOA疾病进展,其机制可能与减少滑膜和软骨组织中IL-1β、IL-6及TNF-α的表达有关。

    2024年01期 v.49;No.280 48-55页 [查看摘要][在线阅读][下载 1369K]
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  • 过氧化物酶体增殖物激活受体γ对丙泊酚麻醉术后大鼠认知功能的影响

    陈筑梅;黄淑花;曾庆繁;

    目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)对丙泊酚麻醉术后大鼠认知功能的影响。方法 80只大鼠随机均分为对照(C)组(生理盐水10 mL/kg腹腔注射)、吡格列酮(P)组(吡格列酮溶解于生理盐水后10 mg/kg腹腔注射)、生理盐水(N)组(生理盐水10 mL/kg腹腔注射)及GW9662(G)组[GW9662抑制剂100 mg溶解于二甲基亚砜(DMSO)溶液100 mL中,2 mg/kg腹腔注射],连续5 d,第6天P组、N组及G组大鼠予丙泊酚麻醉下行剖腹探查手术,C组大鼠不进行手术与麻醉处理;手术后24 h取各组大鼠8只麻醉处死,取海马区脑组织,分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)和Western blot方法检测海马组织β淀粉样蛋白(Aβ)、磷酸化的微管相关蛋白(P-Tau)及PPARγ水平;手术后第5天,取各组大鼠2只麻醉处死,取海马组织制作切片,采用苏木精-伊红染色(HE)染色观察海马体细胞变化情况;手术后第7天,取各组大鼠10只,采用Morris水迷宫实验检测术后认知功能。结果 N组大鼠海马区Aβ沉积、P-Tau表达较C组增加(P<0.05),P组较N组减少(P<0.05),G组较N组增加(P<0.05);P组大鼠海马区PPARγ表达较N组增加(P<0.05),G组较N组降低(P<0.05);C组和P组大鼠海马体细胞排列紧密、膜清晰,G组与N组海马体细胞排列紊乱、细胞核核固缩;与C组比较,N组大鼠逃逸潜伏期延长、穿越平台次数减少及目标象限游动时间缩短(P<0.05);与N组比较,P组大鼠逃逸潜伏期缩短、穿越平台次数较多及目标象限游动时间延长(P<0.05),G组大鼠逃逸潜伏期延长、穿越平台次数减少及目标象限游动时间缩短(P<0.05);结论 提高PPARγ水平可以改善丙泊酚麻醉术后大鼠的认知功能障碍。

    2024年01期 v.49;No.280 56-62页 [查看摘要][在线阅读][下载 1196K]
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  • 吡非尼酮对人肝星状细胞LX2增殖、活化以及糖酵解途径的影响

    李雪莹;姜虹羽;张帅;周石;段庆红;

    目的 探讨吡非尼酮(PFD)对人肝星状细胞LX2增殖、活化以及糖酵解途径的影响,分析其抗肝纤维化的作用途径。方法 用10μg/L转化生长因子-β1(TGF-β1)激活LX2细胞,将LX2细胞分为正常组[0.1%二甲基亚砜(DMSO)]、对照组(10μg/L TGF-β1+0.1%DMSO)及实验组(10μg/L TGF-β1+2、4、6及8 mmol/L PFD);用CCK-8法和平板克隆实验评价LX2细胞增殖能力,试剂盒检测细胞培养上清中的葡萄糖及乳酸水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(COL1A1)、葡萄糖转运蛋白1(Glut1)、己糖激酶2(HK2)、血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)、M2型-丙酮酸激酶(PKM2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)以及单羧酸转运蛋白1(MCT1)蛋白表达,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测α-SMA、COL1A1、Glut1、HK2、PKM2、LDHA mRNA表达。结果 与正常组比较,对照组LX2细胞的增殖能力增强,α-SMA、COL1A1蛋白及mRNA表达增加(P<0.05),葡萄糖消耗及胞外乳酸积累增多,Glut1、HK2、PFKP、PKM2、LDHA、MCT1蛋白及Glut1、HK2、PKM2、LDHA mRNA水平升高;与对照组比较,实验组LX2细胞增殖受到抑制,α-SMA、COL1A1蛋白表达降低,细胞葡萄糖消耗及胞外乳酸积累减少,LX2细胞Glut1、HK2、PFKP、PKM2、LDHA、MCT1的蛋白及Glut1、HK2、PKM2、LDHA mRNA水平下降(P<0.05)。结论 PFD能抑制LX2细胞的增殖及活化,减少细胞外基质分泌,其抗纤维化能力可能与糖酵解水平下调、细胞能量代谢受扰有关。

    2024年01期 v.49;No.280 63-70页 [查看摘要][在线阅读][下载 1516K]
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  • 载阿霉素纳米粒温敏凝胶的制备及评价

    杜华康;陆苑;金阳;陈玉颖;王永林;李勇军;刘文;

    目的 对制备出可用于肝动脉化疗栓塞(TACE)的载阿霉素纳米粒温敏凝胶(DOX-NPs-Gel)复合体系的相关特性进行评价。方法 以乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为载体,采用复乳法制备载阿霉素纳米粒(DOX-NPs),考察其外观、粒径、PDI和Zeta电位,经冷冻干燥得DOX-NPs冻干粉,将其分散于壳聚糖(CS)/β-甘油磷酸(β-GP)温敏凝胶(Gel),制得DOX-NPs-Gel;采用倒瓶法考察Gel、DOX-Gel、空白-NPs-Gel及DOX-NPs-Gel在37℃下的胶凝化时间及胶凝温度;扫描电镜观察微观结构;通过兔耳中动脉栓塞实验考察了空白-NPs-Gel的栓塞性能;通过在皮下注射空白-NPs-Gel于不同时间脱颈死小鼠,剥离出空白-NPs-Gel,测量其大小及质量,评价其吸收特性;采用动态膜透析法考察DOX、DOX-NPs、DOX-Gel的体外释放;采用无膜溶出法考察DOX-NPs-Gel的体外释放。结果 制备出的DOX-NPs形态规则,粒径为(186.68±5.99)nm,多分散系数(PDI)为(0.17±0.01),Zeta电位为(-23.33±1.54)mV,包封率和载药量分别为(77.10±4.46)%和(2.64±0.19)%;DOX-NPs-Gel 37℃下胶凝化时间为(165±15)s,胶凝化温度为(34.67±0.47)℃,冻干后其微观结构为整齐紧密的多孔结构;该复合体系可顺利通过微导管注射,可栓塞兔耳中动脉,且在皮下可被缓慢吸收;体外释放结果显示,第7天时DOX-NPs-Gel中DOX和DOX-NPs的释放率分别为(6.15±0.19)%和(47.25±5.11)%。结论 本研究制备的DOX-NPs-Gel在体温下可快速胶凝、可栓塞血管和皮下吸收,能够缓慢释放DOX-NPs。

    2024年01期 v.49;No.280 71-79页 [查看摘要][在线阅读][下载 1441K]
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  • 贵州老年流动人口与常住人口心理健康状况调查

    兰懿川;黄列玉;

    目的 比较贵州老年流动人口与常住人口心理健康状况,为老年人心理健康促进提供参考。方法 采用问卷调查的方法,对贵州省342名60岁及以上老年人进行积极老化、社会网络及抑郁等相关测评,比较贵州老年流动人口与常住人口心理健康状况。结果 本次心理测评的342人中有75人抑郁症状阳性,占21.9%,其中流动人口为36人(24.8%);常住人口39人(19.8%),抑郁症状阳性检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05);流动老人与常住老人在积极老化、抑郁症状上得分比较,,差异无统计学意义(P>0.05);在社会网络总分及其两个分维度得分上低于常住老人,差异有统计学意义(P<0.001)。结论 贵州老年常住人口社会网络管理优于流动人口,可考虑加强流动老人的社会网络管理,以促进其心理健康。

    2024年01期 v.49;No.280 80-83页 [查看摘要][在线阅读][下载 1068K]
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  • MLMT与MLST在新生隐球菌基因分型中的应用研究

    朱键;曹佳非;康颖倩;三上襄;Wieland Meyer;

    目的 探讨多位点微卫星灶分型(MLMT)和多位点序列分型(MLST)在新生隐球菌(C.neoformans)基因分型中的应用。方法 提取22株来源于国内及日本已明确为新生隐球菌的菌株DNA,经MLMT及MLST相应位点的引物进行扩增、测序;计算各微卫星灶(CNG1、CNG2及CNG3)序列中简单重复序列的重复数,确定菌株MLMT的基因型;将本研究菌株的MLST中各位点序列和网上数据库相应序列进行对比,获取该菌株的MLST基因型;比较两种方法在分型中分辨能力。结果 在22株菌中,有16株的基因型为MLMT17/MLST5(16/22,72.73%),MLMT将所有菌株分为7型,而MLST分为4型;根据MLST分型,MLMT17、16、34及39的菌株为MLST5;MLMT2、14、29相对应MLST66、32及31;两种方法的分型分辨能力比较,差异无统计学意义(P=0.488)。结论 MLMT-17/MLST 5是我国和日本的新生隐球菌常见基因型,包含CNG1、CNG2及CNG3位点的MLMT可作为MLST的替代或补充。

    2024年01期 v.49;No.280 84-89页 [查看摘要][在线阅读][下载 1277K]
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  • 氧化低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞增殖及 circRNA-CER表达的影响

    陈万;王小静;刘晗;赵郑波;

    目的 探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC)后环状RNA circRNA-CER(circRNA-100876)的表达及其对HUVEC增殖的影响。方法 分别以不同浓度ox-LDL(40、60、80、100及200 mg/L)刺激HUVEC 24 h,以及以100 mg/L ox-LDL刺激HUVEC 6、12、24及48 h,利用实时荧光定量PCR验证circRNA-CER在细胞中的表达水平;构建circRNA-CER特异性过表达质粒并进行细胞转染,采用CCK8实验研究circRNA-CER在血管内皮细胞增殖中的作用;荧光定量PCR检测circRNA-CER对miR-136表达的影响;Western blot检测过表达circRNA-CER后血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达水平,荧光素酶报告基因验证circRNA-CER与miR-136、miR-136与VEGF-3′UTR的相互作用。结果 随ox-LDL处理浓度增加,circRNA-CER在HUVEC中的表达量呈下调趋势,并在100 mg/L时差异有统计学意义(P<0.05);在用该浓度ox-LDL以时间梯度刺激HUVEC后,circRNA-CER表达随刺激时间的延长而下调,在24 h处差异有统计学意义(P<0.05);上调circRNA-CER表达可抑制ox-LDL(100 mg/L、24 h)对HUVEC增殖的抑制作用,上调miR-136的RNA及VEGF的蛋白表达水平,同时干预miR-136表达可阻止circRNA-CER对VEGF表达的调控;荧光素酶报告基因实验证实circRNA-CER与miR-136、miR-136可与VEGF 3′-UTR直接结合。结论 circRNA-CER可阻止ox-LDL对HUVEC增殖的抑制效应,机制为circRNA-CER通过“海绵样”作用调控miR-136后,影响其对下游靶基因VEGF的转录后调控。

    2024年01期 v.49;No.280 90-95页 [查看摘要][在线阅读][下载 1237K]
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  • 薯蓣皂苷经PI3K/AKT通路对肝癌Bel-7402细胞增殖和凋亡的影响

    杨茂辉;冉恒泉;王何斌;刘德钦;李劲;

    目的 分析薯蓣皂苷对肝癌Bel-7402细胞增殖和凋亡的影响并探讨其机制。方法 肝癌Bel-7402细胞分为空白组和薯蓣皂苷低、中、高剂量组(给予1、2、8μmol/L的薯蓣皂苷)及薯蓣皂苷+抑制剂组(给予8μmol/L的薯蓣皂苷+10μmol/L的磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路抑制剂LY294002),于处理后12、24、36、48及72 h时采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞活力,于24 h时采用流式细胞术检测细胞凋亡情况、采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测p-PI3K和p-AKT的表达。结果 与空白组相比较,薯蓣皂苷低、中、高剂量组细胞活力及p-PI3K、p-AKT表达均下降,凋亡率升高(P<0.05),且各剂量组间两两比较,上述指标水平差异均有统计学意义(P<0.05);与薯蓣皂苷高剂量组比较,薯蓣皂苷+抑制剂组细胞活力及p-PI3K、p-AKT表达下降,凋亡率升高(P<0.05)。结论 薯蓣皂苷可能通过抑制PI3K/AKT通路抑制肝癌Bel-7402细胞增殖,诱导Bel-7402细胞凋亡。

    2024年01期 v.49;No.280 96-100页 [查看摘要][在线阅读][下载 1262K]
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临床研究

  • 左房自动功能成像技术对射血分数保留型心衰患者左房功能的评估价值

    郑丹;梁勤;周海燕;宋林潼;李伟;

    目的 左房自动功能成像技术对射血分数保留型心衰(HFpEF)患者左房功能的评估价值。方法 收集符合HFpEF诊断的73例患者(HFpEF组),记录其N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)值;以同期68例门诊体检健康者作为对照组;根据左房最大容积指数(LAVImax)将HFpEF组患者分为A、B两组,LAVImax<34 mL/m~2为A组,LAVImax≥34 mL/m~2为B组,采集心尖四腔心及心尖两腔心连续至少3个心动周期动态图像,通过左房自动功能成像(LAAFI)描记左房心肌轮廓获得左房三期应变指标[储存期应变(LASr)、管道期应变(LAScd)及收缩期应变(LASct)]以及左房应变衍生参数[左心房充盈指数(LA filling index)、左心房僵硬指数(LA stiffness index)],分析两组间左房三期应变指标及左房应变衍生参数的差异。结果 A、B两组LA stiffness index>对照组,LASr、LAScd、LASct增高(P<0.05);B组LA stiffness index、LA filling index高于A组,LASr、LAScd、LASct低于A组(P<0.05);左房应变及其衍生参数的效能受试者工作特征(ROC)曲线显示,LASr、LAScd及LA stiffness index预测HFpEF的曲线下面积(AUC)相对较大,分别为0.927、0.910、0.922,截断值为34.5%、-18.5%、0.28,敏感性为80.82%、84.93%、79.45%,特异性为95.59%、77.94%、91.18%;左房应变相关参数与NT-proBNP的相关性分析显示,LASr与NT-proBNP呈负相关(r=-0.279,P<0.05),LA stiffness index与NT-proBNP呈正相关(r=0.423,P<0.05)。结论 左房应变及其衍生参数可无创定量评估HFpEF患者的左房功能障碍。

    2024年01期 v.49;No.280 101-108页 [查看摘要][在线阅读][下载 1252K]
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  • 正常足月新生儿出生3个月内肠道菌群的定植规律分析

    张金铃;姜华;杨萌婷;马丽;雷光霞;杜欣欣;冯梅;余涵;王鉴;

    目的 探讨正常足月新生儿出生3个月内肠道菌群的定植规律。方法 收集20例正常足月新生儿及其孕母的临床资料,取新生儿出生后第1天(C0)、第3天(C1)、第1周(C2)、第1个月(C3)及第3个月(C4)的粪便标本,采用Illumina NovaSeq PE250进行16S核糖体RNA(16S rRNA)V3+V4区测序,采用生物信息学分析肠道菌群的定植规律。结果 正常足月新生儿粪便中肠道菌群的扩增子序列变异体(ASV)数目、Shannon指数于C0时最高;正常足月新生儿出生3个月内的肠道菌群以变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、放线菌门(Actinobacteriota)、拟杆菌门(Bacteroidota)为优势菌门,Proteobacteria相对丰度随日龄由高变低再逐渐增高,Firmicutes与之相反;正常足月新生儿生3个月内优势菌群在属水平的演变依次为罗尔斯通菌属(Ralstonia)、链球菌属(Streptococcus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium),随日龄增加,Bifidobacterium相对丰度逐渐升高,C4时达44.18%且为优势菌属。结论 正常足月新生儿生3个月内肠道菌群的多样性、组成结构及相对丰度出现变化。

    2024年01期 v.49;No.280 109-114页 [查看摘要][在线阅读][下载 1195K]
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  • 贵阳市某三甲医院妇产科医护人员加速康复外科知信行现状及讲座的干预效果

    赵文文;杨涵琳;任小玉;朱焱;訾聃;

    目的 了解贵阳市某三甲医院妇产科医护人员加速康复外科(ERAS)知信行现状,探讨讲座在改善妇产科医护人员加速康复知信行中的效果。方法 以贵阳市某三甲医院妇产科146名医护人员为研究对象,自行设计调查问卷,计算问卷各维度得分评价调查对象ERAS知信行状态,采用单因素方差分析妇产科医护人员ERAS知信行得分;对妇产科医护人员进行1次讲座形式的知识宣教,比较讲座前后妇产科医护人员ERAS知信行得分变化情况。结果 讲座前妇产科医护人员加速康复外科知识得分较低,得分率仅为65.74%;单因素方差分析和独立样本t检验显示,研究对象知信行得分在学历、年龄、科室、职称、工作年限方面比较,差异有统计意义(P<0.05);讲座后妇产科医护人员加速康复外科知信行整体得分及知识、态度、行为各项单独得分均较讲座前提高(P<0.05)。结论 妇产科医护人员加速康复外科知识得分较低,对妇产科医护人员进行讲座形式的培训后,可有效提高医护人员的知信行状况。

    2024年01期 v.49;No.280 115-120页 [查看摘要][在线阅读][下载 1087K]
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  • 基于数据挖掘某院中医药治疗腹泻型肠易激综合征的用药规律

    吴燕;黎豫川;张远哲;徐献梅;

    目的 采用数据挖掘方法探讨医院中医药治疗脾虚腹泻型肠易激综合征(IBS-D)的组方用药规律。方法 检索2016—2022年贵州某医院中医药治疗脾虚型IBS-D处方,采用Microsoft Excel 2007建立中药处方信息表,利用SPSS 23.0与SPSS Modeler18.0软件进行性味归经、功效、频数、关联规则、聚类分析等以挖掘医院中医药治疗脾虚型IBS-D的用药规律。结果 共纳入中药处方502首,处方中药味多见甘味,药性以温、平性为主,多归于脾、胃经,治疗药物以补虚药、行气药为主,药物使用频次较高的中药有白术、木香、陈皮等;治疗常用药对组合有白术-木香、白术-陈皮、木香-陈皮等,聚类分析得出3类处方,主要功效益气健脾、行气化痰、渗湿止泻等。结论 医院中医药治疗脾虚型IBS-D组方规律以益气健脾、行气化痰、渗湿止泻为主要治法,临床常用香砂六君子汤、参苓白术散等加减方辨证治疗。

    2024年01期 v.49;No.280 121-125+133页 [查看摘要][在线阅读][下载 1275K]
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  • 全身免疫炎症指数对弥漫大B细胞淋巴瘤老年患者预后的评估价值

    石倩筠;严芝强;聂微;王杨;何水;杨芳;

    目的 探讨全身免疫炎症指数(SⅡ)对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)老年患者预后的评估价值。方法 选取DLBCL老年患者91例作为研究对象,收集所有患者年龄、性别、是否吸烟、临床分期、美国东部肿瘤协作组(ECOG)评分、国际预后指数(IPI)、结外累及个数等资料;抽取患者空腹血,采用库尔特原理检测血清血小板计数(PLT)、中性粒细胞(NEA)及淋巴细胞(LYM)数,并根据PLT、NEA及LYM计算SⅡ,采用免疫法检测乳酸脱氢酶(LDH)、用免疫比浊法检测β_2-微球蛋白(β_2-MG)水平;采用ROC曲线分析患者SⅡ的截断值,据此截断值将患者分为高SⅡ组和低SⅡ组,采用单因素及多因素分析2组患者临床特征的差异;随访2组患者的生存情况,计算3年总生存(OS)率及无进展生存(PFS)率;采用R-studio构建以SⅡ为主的DLBCL老年患者预后预测模型。结果 ROC曲线结果显示SⅡ临界值为582.6,DLBCL老年患者分为高SⅡ组(SⅡ≥582.6,n=57)和低SⅡ组(SⅡ<582.6,n=34),2组患者ROC的曲线下面积(AUC)为0.651,95%CI为0.535~0.766(P=0.015);生存曲线显示,低SⅡ组DLBCL老年患者OS及PFS均高于高SⅡ组;高SⅡ是影响DLBCL老年患者OS及PFS的独立预后因素(P<0.05);DLBCL老年患者以SⅡ为主的预后预测模型具有统计学意义(P<0.05)。结论 SⅡ水平与DLBCL老年患者的预后相关,高SⅡ组患者预后较差。

    2024年01期 v.49;No.280 126-133页 [查看摘要][在线阅读][下载 1305K]
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  • 血浆纤溶酶原激活剂抑制物-1联合C反应蛋白与白蛋白比值对老年脓毒症患者28天预后的评估价值

    张雅静;韩雪;

    目的 探讨纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)联合C反应蛋白与白蛋白比值(CAR)对老年脓毒症患者28 d预后的预测价值。方法 90例老年脓毒症患者作为研究组,30名同期老年体检健康者作为对照组;比较研究组入院次日、对照组体检当日的血浆PAI-1水平和CAR,记录研究组的白细胞计数、血小板计数及淋巴细胞计数,计算序贯器官衰竭评分(SOFA)和急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ);分析老年脓毒症患者血浆PAI-1水平和CAR与病情严重程度的相关性,不同预后(根据患者28 d的生存结局分为生存组和死亡组)老年脓毒症患者一般资料、实验室指标及血浆PAI-1水平和CAR,采用多因素logistic回归分析影响老年脓毒症患者28 d预后的独立危险因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评价血浆PAI-1、CAR对老年脓毒症患者入院28 d预后的预测价值。结果 研究组血浆PAI-1水平和CAR均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);老年脓毒症患者血浆PAI-1、CAR与SOFA评分、APACHEⅡ评分分别呈正相关关系(P<0.05);28天内,老年脓毒症患者死亡31例(34.44%)、存活59例(65.56%),生存组的淋巴细胞计数高于死亡组,SOFA评分、血浆PAI-1水平及CAR低于死亡组(P<0.05);多因素logistic回归分析结果表明血浆PAI-1水平和CAR是影响老年脓毒症患者28 d预后的独立危险因素(P<0.05),ROC曲线分析结果显示,血浆PAI-1、CAR及两者联合预测老年脓毒症患者28 d内死亡的AUC分别为0.752(95%CI为0.642~0.862,P<0.001),0.842(95%CI为0.745~0.939,P<0.001)及0.887(95%CI为0.796~0.977,P<0.001)。结论 老年脓毒症患者的血浆PAI-1水平和CAR升高,两者联合对患者28 d预后具有较好的预测价值。

    2024年01期 v.49;No.280 134-138+144页 [查看摘要][在线阅读][下载 1151K]
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  • 糖皮质激素不同给药方式对AECOPD患者临床疗效的影响

    龙宇;刘礼银;杨然;胡系伟;

    目的 探究糖皮质激素不同给药方式在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者治疗中的临床疗效。方法 88例AECOPD患者随机均分为吸入组与静脉组,两组患者均给予抗感染、吸氧、祛痰、解痉平喘、舒张气道等对症支持治疗的基础上,静脉组患者静脉注射甲泼尼龙琥珀酸钠(40 mg/次、1次/d),吸入组患者雾化吸入布地奈德(2 mg/次、3次/d),两组均治疗7 d;比较两组患者治疗前后动脉血氧分压(PaO_2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO_2)、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV_1%)、第1秒用力呼气容积占用力肺活量的比值(FEV_1/FVC)、自我评估测试(CAT)评分。结果 与治疗前相比,两组患者治疗后PaO_2均升高、PaCO_2均下降、FEV_1%及FEV_1/FVC均升高(P<0.05);两组患者CAT评分均较治疗前降低(P<0.05);两组间患者治疗疗效相当,但吸入组不良反应发生率低于静脉组(P<0.05)。结论 糖皮质激素治疗AECOPD患者,无论何种给药方式,均可取得良好的治疗效果,但雾化吸入较全身应用不良反应少,安全性更高。

    2024年01期 v.49;No.280 139-144页 [查看摘要][在线阅读][下载 1115K]
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  • TICL V4c植入术后拱高对散光轴旋转角度的影响

    杨钰涵;蒋浩;龙秋蓉;张丽颖;谷浩;

    目的 分析有晶体眼散光型人工晶体(TICl V4c)植入术后拱高对人工晶体散光轴旋转角度的影响。方法 选取眼科接受TCIL V4c植入术的近视患者89例(174眼),按照术后1周拱高的大小分为低拱高组、中拱高组以及高拱高组,术前检测患者裸眼视力(UCVA)、最佳矫正视力(BCVA)、屈光情况(球镜度数及柱镜度数)、非接触式眼压(IOP)、前房深度(ACD)以及内皮细胞计数(ECD);术后随访2年,记录患者的拱高变化情况及散光轴旋转角度情况,分析拱高与散光轴旋转角度的关系。结果 TICl V4c植入术后2年,低、中、高拱高组3组患者术后平均UCVA均高于术前(P<0.01);术后2年,3组患者的UCVA(0.97±0.24)好于术前BCVA(t=-8.78,P<0.01);3组近视患者术前的平均球镜度(-10.10±3.76)D提升至术后的(-0.39±0.81)D,术前的平均柱镜度(-2.36±1.03)D提升至术后的(-0.44±1.53)D(P<0.01);术后随访3组患者IOP、ECD均保持在正常范围内,且与术前比较,差异无统计学意义(P>0.05);所有患者术后均未发生青光眼、视网膜脱离以及葡萄膜炎等严重并发症;随访2年中3组患者的拱高变化不明显(P>0.05);患者晶体散光轴均发生不同程度的旋转,相关性分析表明,拱高与散光轴旋转角度不存在相关性(r=-0.117,P>0.05)。结论 TICL V4c植入术具有良好的有效性和安全性,术后产生的拱高对散光轴旋转角度并无明显影响。

    2024年01期 v.49;No.280 145-150页 [查看摘要][在线阅读][下载 1107K]
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  • 滋肾育胎丸联合优思明对PCOS不孕症患者子宫内膜容受性、内分泌指标及妊娠结局的影响

    李素芬;黄燕;

    目的 分析滋肾育胎丸联合优思明对多囊卵巢综合征(PCOS)不孕症患者子宫内膜容受性、内分泌指标及妊娠结局的影响。方法 将80例PCOS不孕症患者均分为对照组和观察组,对照采用优思明治疗,观察组采用滋肾育胎丸联合优思明治疗,两组均治疗3个月;收集患者的临床资料,比较两组患者入院及治疗后的临床疗效、子宫内膜容受性[血流搏动指数(PI)、阻力指数(RI)、子宫内膜血管指数(VI)、血流指数(FI)]、内分泌指标[睾酮(T)、促黄体生成素(LH)、促卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E_2)、垂体泌乳素(PRL)、空腹胰岛素(FIN)、空腹血糖(FPG)]、血管内皮生长因子(VEGF)、妊娠结局及不良反应发生率。结果 观察组临床有效率高于对照组(P<0.05);治疗后,两组患者子宫内膜厚度、A型子宫内膜率、VI、FI、E2水平均上升,PI、RI、子宫内膜多层率、T、LH、FSH、PRL、FIN、FPG、VEGF均下降(P<0.05),且观察组子宫内膜厚度、A型子宫内膜率、VI、FI、E2高于对照组(P<0.05),观察组PI、RI、子宫内膜多层率、T、LH、FSH、PRL、FIN、FPG、VEGF低于对照组(P<0.05);观察组活产率、妊娠率高于对照组,流产率低于对照组(P<0.05);两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 滋肾育胎丸联合优思明治疗PCOS不孕症患者效果优于单一优思明治疗,可改善患者子宫内膜容受性、内分泌指标,并提高患者的妊娠率及活产率,安全性较好。

    2024年01期 v.49;No.280 151-156页 [查看摘要][在线阅读][下载 1104K]
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  • 《贵州医科大学学报》稿约

    <正>《贵州医科大学学报》是医药卫生类综合性学术期刊,国内外公开发行,主要刊登医、药、卫生及生物学领域的科学研究,医疗工作中的新方法、新技术文章,主要栏目有研究生专栏、基础研究、临床研究及技术与方法等。1投稿要求1.1采用网上采编系统投稿,第一次投稿的作者请先注册,获取账号后再登陆。通过主页网址进入采编系统后,请进入“作者工作中心”,按照系统提示进行投稿操作,系统中“*”为必填项,如果不能完整填写则无法完成投稿。

    2024年01期 v.49;No.280 2页 [查看摘要][在线阅读][下载 484K]
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