论著

  • 用cox1基因片段的PCR鉴别亚洲带绦虫和牛带绦虫

    陈峥宏;郎书源;吴晓娟;包怀恩;

    目的:用cox1基因片段的PCR技术对亚洲带绦虫和牛带绦虫的快速鉴别。方法:用亚洲带绦虫和牛带绦虫线粒体cox1基因片段的特异性引物以及带绦虫cox1基因片段的通用引物,对贵州省都匀地区和从江地区的带绦虫虫卵和节片DNA进行常规PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测和核酸序列测定,并用NC-BI Blast对扩增产物的核酸序列与NCBI数据库中带绦虫的cox1基因进行比对。结果:5株都匀带绦虫DNA样品经亚洲带绦虫cox1基因片段的特异性引物PCR,均扩增出约260 bp的产物,PCR产物的核酸序列与NCBI数据库中亚洲带绦虫线粒体cox1基因片段的同源性为100%;2株从江带绦虫的DNA样品用亚洲带绦虫特异性引物和牛带绦虫特异性引物的PCR均未见扩增产物,而通用引物PCR则扩增出约1 000 bp的产物,核酸序列与NCBI数据库中牛带绦虫线粒体cox1基因片段的同源性为99%,在牛带绦虫特异性引物的结合位点存在一个碱基差异。结论:常规PCR扩增特异性的cox1基因片段可快速鉴定亚洲带绦虫;从江牛带绦虫株的cox1基因特异性片段部分存在变异,导致与特异性引物结合能力的差异,可采用cox1基因通用引物PCR结合测序进行鉴定。

    2009年03期 v.34;No.138 239-241+261页 [查看摘要][在线阅读][下载 158K]
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  • 黑龙江省蚋类(双翅目:蚋科)补点调查

    吴慧;杨明;陈汉彬;

    目的:对黑龙江省进行蚋类补点调查,进一步补充黑龙江省蚋类区系资料。方法:选择黑龙江省6个代表性地区采集幼蚋,经隔离培养育出两性成虫,采用常规方法制片、鉴定、编制名表并进行相关讨论。结果:记载黑龙江省蚋属3亚属13种,其中含3个新种。结合前人报告,该省计已知蚋类3属8亚属35种。结论:黑龙江省具有蚋类多样性及明显的地方性。

    2009年03期 v.34;No.138 242-245+314页 [查看摘要][在线阅读][下载 135K]
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  • 肿瘤坏死因子α功能抑制剂对肺气肿大鼠气道炎症的影响

    李军利;陈平;张程;张湘燕;

    目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)抑制剂———重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhT-NFR:Fc)对肺气肿大鼠气道炎症的影响。方法:48只大鼠分为正常对照组、肺气肿组、rhTNFR:Fc干预组(干预组)和干预对照组,单纯吸烟法建立肺气肿模型;后3组烟雾暴露达1月时,干预组给予rhTNFR:Fc进行干预,干预对照组给予空白对照制剂;熏烟80 d后,处理所有大鼠,正常对照组和肺气肿组肺组织切片行苏木素-伊红染色观察形态学改变,定量测定肺平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN);支气管肺泡灌洗液(BALF)计数各组白细胞总数、中性粒细胞和巨噬细胞计数及其百分比,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组血清及BALF中的TNF-α浓度。结果:(1)肺气肿组MLI高于正常对照组,MAN低于正常对照组(P<0.05);(2)肺气肿组血清TNF-α浓度高于正常对照组和rhTNFR:Fc干预组(P<0.05),和干预对照组比较差异无显著性(P>0.05);肺气肿组BALF中TNF-α浓度高于正常对照组(P<0.05),但和rhTNFR:Fc干预组、干预对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);(3)肺气肿组BALF中白细胞总数、中性粒细胞计数及百分比高于正常对照组(P<0.01,P<0.05和P<0.05)和rhTNFR:Fc干预组(P<0.01,P<0.05和P<0.05),与干预对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TNF-α与吸烟大鼠的肺气肿形成有关,并影响其气道炎症;rhTNFR:Fc对减轻其气道炎症具有一定作用。

    2009年03期 v.34;No.138 246-249页 [查看摘要][在线阅读][下载 149K]
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  • 人BclG_L基因siRNA逆转录病毒的制备及其对T淋巴细胞增殖的影响

    罗娜;郭晟;杨承英;费蕾;吴胜昔;陈永文;吴玉章;郝飞;

    目的:制备表达针对BclGL基因的siRNA逆转录病毒,研究其对体外培养Jurkat细胞中BclGL基因的沉默效应及Jurkat细胞增殖的影响。方法:利用siRNA预测软件获取3条siRNA编码序列,插入pSilencer5.1-H1构建重组逆转录病毒siRNA表达质粒,脂质体法转染PT67细胞包装重组逆转录病毒pSilencer 5.1-H1-BclGL,体外感染Jurkat细胞,嘌呤霉素筛选病毒感染阳性细胞克隆,实时定量PCR及Western验证干扰效率;CCK-8法体外检测BclGL基因沉默后Jurkat细胞的增殖能力。结果:酶切及测序结果证实,表达siRNA的逆转录病毒构建成功,重组病毒表达的siRNA能有效干扰Jurkat细胞内BclGL基因的表达;BclGL表达下调可增强Jurkat细胞的增殖能力ela。结论:成功制备了表达人BclGL基因siRNA的重组逆转录病毒,并证实其对Jurkat细胞的生长抑制效应。

    2009年03期 v.34;No.138 250-254页 [查看摘要][在线阅读][下载 257K]
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  • 增强型绿色荧光蛋白-C_1转染示踪骨髓间充质干细胞

    伍徐娴;何志旭;沈祥春;周中军;

    目的:应用增强型绿色荧光蛋白-C1(enhanced green fluorescent protein,pEGFP-C1)标记骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MMSCs),以期为MMSCs的体内移植提供示踪方法。方法:在体外分离培养大鼠MMSCs,流式细胞仪检测细胞表型,以脂质体介导法转染质粒增强型绿色荧光蛋白基因,荧光显微镜观察基因表达。结果:pEGFP-C1在基因转染24 h后开始表达,48~72 h达高峰,12~14 d后有较多的表达。结论:由脂质体介导的质粒pEGFP-C1可较为安全、有效地转染MMSCs,是一种较为理想的干细胞示踪方法。

    2009年03期 v.34;No.138 255-258页 [查看摘要][在线阅读][下载 197K]
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  • 用PCR扩增16Sr RNA基因鉴定幽门螺杆菌的细胞壁缺陷型

    王菲;陈峥宏;赵亮;

    目的:探讨幽门螺杆菌及其稳定L型的检测与鉴定方法。方法:用抗生素诱导、滤菌器过滤、非高渗透压培养基培养获得幽门螺杆菌稳定L型纯培养物,对幽门螺杆菌及其稳定L型进行16SrRNA基因的PCR扩增及序列测定。结果:幽门螺杆菌及其稳定L型的16SrRNA基因PCR扩增产物经1%琼脂糖电泳,在紫外检测仪下可见550 bp的DNA条带,测序结果经NCB I B last分析比对,基因同源性可达100%。结论:16SrRNA基因PCR检测可用于幽门螺杆菌L型及其他形态变异的菌种鉴定。

    2009年03期 v.34;No.138 259-261页 [查看摘要][在线阅读][下载 98K]
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  • 内毒素对离体鼻黏膜上皮细胞IFN-γ、IL-4表达的影响

    杨秀海;李源;高晓勤;

    目的:探讨内毒素(LPS)对鼻黏膜上皮细胞(HNEC)IFN-γ、IL-4表达的影响。方法:设LPS组、LPS+地塞米松(DXM)组、LPS+吡咯啉烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)组及生理盐水空白对照组。采用酶联免疫吸附及原位杂交方法检测培养上清液中IFN-γ、IL-4及HNEC内NF-кB p50mRNA的表达,凝胶电泳迁移率检测NF-кB p50,观察PDTC及DXM对NF-кB p50活化抑制后IFN-γ和IL-4蛋白水平。结果:(1)0~100μg/L LPS随浓度的增加,IFN-γ分泌量增多;>100μg/L后,IFN-γ分泌量减少;100μg/LLPS刺激HNEC分泌IFN-γ的作用最强。0~20μg/L LPS随浓度的增加,IL-4分泌量增多;>20μg/L后,IFN-γ分泌量减少;20μg/L LPS刺激HNEC分泌IL-4的作用最强,40μg/L LPS刺激IFN-γ和IL-4的分泌有交叉,二者维持于一定的水平。(2)50μg/L LPS刺激HNEC后随时间延长IFN-γ分泌量逐渐增加,从4 h开始即有明显上升(P<0.05),8 h达到峰值;IL-4随时间延长分泌量逐渐增加,从2 h开始即有明显上升(P<0.05),6 h达到峰值。(3)PDTC和DXM均抑制NF-кB p50的表达和活性,减少HNEC分泌IFN-γ和IL-4,DXM4.0μg/L时,下降更明显,但高于此浓度时,不引起进一步的降低。结论:LPS对HNEC的刺激反应与浓度呈剂量依赖性,适当浓度的LPS刺激有利于HNEC分泌的Th1/Th2细胞因子维持平衡状态;过高或过低浓度的LPS刺激可诱导HNEC的Th1/Th2细胞因子失衡分泌,这可能是GNB在慢性鼻、鼻窦炎(CRS)的致病机理。

    2009年03期 v.34;No.138 262-266页 [查看摘要][在线阅读][下载 476K]
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  • 银杏黄酮苷元对内皮细胞植物血凝素样低密度脂蛋白受体-1表达的影响

    何艳;付永昕;吴立荣;方颖;李安敏;陈云;

    目的:探讨银杏黄酮苷元对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导脐静脉内皮细胞株ECV304植物血凝素样低密度脂蛋白受体-1(Lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1,LOX-1)表达的调节作用。方法:应用逆转录聚合酶链式反应、SP免疫组织化学法,探讨ox-LDL诱导下内皮细胞表达LOX-1及银杏黄酮苷元的干预作用。结果:6.25~25 mg/L银杏黄酮苷元与脐静脉内皮细胞株ECV304共同培养6~48 h可显著抑制ox-LDL诱导的内皮细胞LOX-1mRNA和蛋白表达(P<0.05),具有浓度、时间效应关系(P<0.05);LOX-1拮抗剂聚肌苷酸可抑制ox-LDL诱导的内皮细胞LOX-1mRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论:ox-LDL可能通过LOX-1导致内皮功能障碍,银杏黄酮苷元可显著抑制ox-LDL诱导的内皮细胞LOX-1表达,这可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。

    2009年03期 v.34;No.138 267-270+278页 [查看摘要][在线阅读][下载 432K]
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  • 儿童青少年手腕部骨发育与X线骨龄测评

    杜霞;焦俊;

    目的:探讨儿童青少年手腕部骨龄标准,了解手腕部骨发育的特点及变化趋势,建立新的骨龄图谱。方法:对健康儿童青少年拍摄左侧手腕部正位X片,采用TW 3法测量手腕部骨龄及百分位表,并与既往标准进行比较。结果:(1)获得新的记分法骨龄标准;(2)新的TW 3标准与TW 2CH(TW 2中国人南方标准)比较,各年龄组R系列骨分值增加,C系列变化不明显;(3)与既往标准比较,7~12岁儿童R系列骨发育提前约0.5岁,C系列提前0.5~1岁,13~18岁青少年变化不明显。结论:R系列受时代影响较大,7~12岁儿童骨发育提前,而13~18岁青少年骨发育变化不明显。

    2009年03期 v.34;No.138 271-275+278页 [查看摘要][在线阅读][下载 426K]
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  • 蝇蛆壳聚糖黏均分子量的测定

    覃容贵;吴建伟;国果;付萍;

    目的:测定蝇蛆壳聚糖特性黏度,并计算其黏均分子量。方法:利用乌式黏度计,测定高聚物蝇蛆壳聚糖的黏度,采用外推法和一点法计算,进而得出其分子量。结果:外推法和一点法均可用于壳聚糖黏度及分子量的测定。结论:一点法只需测得1个浓度下的壳聚糖溶液的相对黏度和增比黏度,即可简便、快速、准确地测出壳聚糖的特性黏度,进而求得其黏均分子量,相对一步法更简便,但外推法的可靠性及准确性更高。

    2009年03期 v.34;No.138 276-278页 [查看摘要][在线阅读][下载 126K]
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  • 鼠肺表面活性物质结合蛋白D提取方法的改良及鉴定

    赵亮;陈峥宏;王菲;

    目的:提取及纯化SD大鼠肺灌洗液中表面活性物质结合蛋白D(SP-D)。方法:取SD大鼠肺泡灌洗液,经Tris-HCl-EDTA法提取和maltose-agarose亲和层析法纯化SP-D,用SDS-PAGE电泳及SP-D与幽门螺杆菌的玻片凝集试验鉴定。结果:从SD大鼠肺灌洗液中提取出较高浓度的蛋白,经SDS-PAGE电泳检测,分子量约43 kD,提取的蛋白可与幽门螺杆菌发生明显凝集。结论:采用maltose-agarose亲和层析法可以从SD大鼠肺灌洗液中获得较高纯度的SP-D。

    2009年03期 v.34;No.138 279-281页 [查看摘要][在线阅读][下载 122K]
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  • 云南白药对血小板的释放与代谢反应的影响

    唐正龙;王兴;伊彪;李自力;梁成;

    目的:研究云南白药对血小板颗粒内容物释放和代谢反应的影响,探讨其止血和抗炎机理。方法:87例正颌外科手术患者随机分为试验组(43例)和对照组(44例),分别在术前3日口服云南白药胶囊和安慰剂胶囊;采集术前和术中静脉血,用酶联免疫吸附法测定手术开始前和术中血浆11-去氢-血栓烷B2(11-Dehydro-Thromboxane B2,11-DH-TXB2)水平;分离和固定血小板,观察血小板超微结构和颗粒内容物的改变。结果:术前实验组血浆11-DH-TXB2(58.83±15.89)ng/L,对照组(69.54±14.43)ng/L,两组比较差异无统计学意义;术中实验组11-DH-TXB2(90.41±38.97)ng/L,对照组(131.78±78.92)ng/L,两组差异有统计学意义;实验组术中血小板内α-颗粒数目减少,两组比较具有统计学差异。结论:云南白药抑制血小板11-DH-TXB2的生成,反映了血栓烷A2生成减少,不会增加手术区域微血管的收缩,可能有利于改善术后局部血液循环;在手术刺激诱导下云南白药可促进血小板颗粒内容物的释放,有利于提高术中凝血功能,减少手术中出血量。

    2009年03期 v.34;No.138 282-285+289页 [查看摘要][在线阅读][下载 328K]
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  • 沙眼衣原体感染与精子凋亡关系的初探

    杨丹;郑立宏;高晓勤;石家齐;

    目的:探讨精液沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,CT)感染与精子凋亡的关系,为研究男性不育提供新思路。方法:沙眼衣原体的检测用免疫层析法,采用瑞-姬染色精子,观察精子形态变化;用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡精子。结果:精液CT阳性组精子凋亡率(33.03±14.98)%,正常对照组精子凋亡率为(9.68±2.78)%,组间差异显著(P<0.01)。结论:精液CT感染导致精子凋亡率增加,CT感染可能是男性不育的重要原因之一。

    2009年03期 v.34;No.138 286-289页 [查看摘要][在线阅读][下载 279K]
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  • 脑性瘫痪早期干预模式对早产儿发育及预后的影响

    童雪涛;马贤芝;于海丽;张静;董海燕;

    目的:探讨脑性瘫痪早期干预模式对早产儿发育及预后的影响。方法:早产儿434例(除外先天畸形和遗传代谢性疾病)分为常规组和干预组,干预组早产儿出院后于家中在早期教育的基础上重点强化按摩、体操、动作和主动运动训练,出现运动异常者早期进行综合康复训练;常规组只接受常规保健指导。结果:1岁时干预组早产儿智力发育指数(MD I)和运动发育指数(PD I)均高于常规组(P<0.01),运动落后发生率低于常规组,两组差异有非常显著性(P<0.001)。结论:脑性瘫痪早期干预模式可以促进早产儿智能和运动功能发育,并改善其预后。

    2009年03期 v.34;No.138 290-293页 [查看摘要][在线阅读][下载 119K]
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  • 胰岛素分泌异常与胰岛素抵抗在妊娠期糖尿病发病中的作用

    朱亚莉;邓冰;孙袁;王彦德;

    目的:探讨胰岛素分泌异常与胰岛素抵抗在妊娠期糖尿病(GDM)发病中的作用。方法:通过检测40例GDM患者(GDM组)和40例正常孕妇(NGT组)的空腹胰岛素(FINS)和空腹血糖(FPG),计算胰岛分泌功能指数(IFI)和HOMA稳态模型胰岛素抵抗指数(IRI),比较两组孕妇胰岛素分泌能力和胰岛素抵抗程度的差异,并分析IFI与IRI之间的关系。结果:反映胰岛素分泌功能的IFI和FINS,GDM组明显高于NGT组(P<0.01);反映胰岛素抵抗程度的IRI,GDM组亦明显高于NGT组(P<0.01);GDM组和NGT组的IFI与IRI均呈显著正相关(r=0.564,P<0.01和r=0.881,P<0.01)。结论:与糖代谢正常的孕妇比较,GDM的孕妇存在胰岛素分泌相对不足和更为严重的胰岛素抵抗。

    2009年03期 v.34;No.138 294-296+299页 [查看摘要][在线阅读][下载 116K]
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  • 贵州省汉族人群载脂蛋白M启动子T-778C基因多态性与冠心病的相关性研究

    黄健;张姝;黄韻祝;韩昉;郑莹莹;江杰;

    目的:探讨贵州省汉族人群载脂蛋白M(apoM)基因启动子区域-778位点T→C置换与冠心病的关系。方法:用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)对220例冠心病患者和195例健康对照者的apoM启动子-778位点进行基因筛查。结果:冠心病病例组中apoM启动子基因-778位点C等位基因的频率显著高于健康对照组(19.1%和12.6%,P=0.011)。结论:apoM启动子基因-778位点携带C等位基因可能是冠心病的一个危险的遗传易感因子。

    2009年03期 v.34;No.138 297-299页 [查看摘要][在线阅读][下载 117K]
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  • 大红袍妇炎宁胶囊治疗大鼠盆腔炎的实验研究

    卢泽恺;曹恒仪;黄勇攀;张晴;叶兰;李诚秀;

    目的:观察大红袍妇炎宁胶囊(DHPJN)的体外抑菌作用和对盆腔炎的治疗作用,为其临床应用提供实验依据。方法:(1)抑菌试验测定DHPJN的最低抑菌浓度(M IC)和最低杀菌浓度(MBC);(2)建立大肠埃希菌大鼠慢性盆腔炎模型和注射肾上腺素的大鼠血瘀模型,观察DHPJN的治疗作用。结果:DHPJN对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、宋内志贺菌、普通变形杆菌及淋病奈瑟菌均具有抑菌作用,减轻大鼠细菌性盆腔炎子宫肿胀程度及炎性损害,降低血瘀症大鼠的全血黏度、红细胞聚集指数及红细胞电泳指数。结论:DHPJN对大鼠盆腔炎有治疗作用。

    2009年03期 v.34;No.138 300-303+307页 [查看摘要][在线阅读][下载 271K]
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  • 复方大血藤对大鼠慢性非细菌性前列腺炎的作用

    汪克蕾;李淑芳;梁冰;

    目的:研究复方大血藤(CDXT)对慢性非细菌性前列腺炎的作用及作用机理,为临床用药提供药理学依据。方法:于SD雄性大鼠前列腺背叶注射消痔灵复制慢性非细菌性前列腺炎(CNP)动物模型,用复方大血藤进行治疗,观察前列腺组织形态学变化,测定大鼠前列腺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)白介素-8(IL-8)水平。结果:复方大血藤能改善CNP模型大鼠前列腺的组织病理结构,减轻炎症反应,降低TNF-α和IL-8水平。结论:复方大血藤可减轻CNP时的慢性炎症病理改变,其作用机制可能与降低前列腺组织中TNF-α和IL-8水平有关。

    2009年03期 v.34;No.138 304-307页 [查看摘要][在线阅读][下载 245K]
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  • 亚甲蓝原料药的稳定性考察

    李莉;汤磊;张敏;黄家宇;张毅;

    目的:考察亚甲蓝原料药的稳定性。方法:亚甲蓝原料药经强光照射(4500 lx)10 d、高温存放(40℃)10 d、高湿存放[25℃,RH(75±5)%]10 d、加速试验[(40±2)℃,RH(75±5)%]6个月、长期试验1年,考察亚甲蓝原料药经不同条件存放后的性状、含量及有关物质的变化。结果:亚甲蓝原料药经光照试验、高湿试验、高温试验、加速试验和长期试验后,所考察指标均符合质量标准要求。结论:亚甲蓝原料药稳定性较好,但具有吸湿性。

    2009年03期 v.34;No.138 308-310页 [查看摘要][在线阅读][下载 74K]
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  • 妊娠期高血压疾病患者血清瘦素、胰岛素水平变化及相关性研究

    熊英;孙长学;李玲;关珊;

    目的:测定妊娠期高血压疾病(HDCP)患者和正常孕妇血清瘦素(Leptin)及胰岛素(INS)水平,探讨Leptin、INS与妊娠期高血压疾病发病的关系。方法:采用放射免疫法测定40例HDCP患者和40例正常晚期妊娠妇女的空腹血清Leptin和INS水平,分析两者相关性,同时测量体重指数和血压。结果:(1)HDCP组血清Leptin、INS水平高于正常妊娠组,P<0.05;(2)HDCP患者中轻度子痫前期组Leptin水平高于妊娠期高血压组,P<0.05;重度子痫前期及子痫组高于轻度子痫前期组,P<0.05;(3)HDCP孕妇血清Leptin与INS水平呈明显正相关,相关系数r=0.767,P<0.01。结论:HDCP患者血清Leptin水平明显升高,且随病情的加重有逐渐升高趋势,HDCP血清Leptin与INS呈正相关关系,高瘦素、高胰岛素血症可能共同参与了HDCP的发生和发展。

    2009年03期 v.34;No.138 311-314页 [查看摘要][在线阅读][下载 120K]
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