- 于声;段斯亮;苏晓庆;
目的:观察灭蚊真菌贵阳腐霉产生类胰蛋白酶(Pr2)所需的诱导条件。方法:通过单因素诱导物、温度、pH值等比较试验摸索其产生Pr2的适宜条件。结果:贵阳腐霉产Pr2的适宜条件是在100 m l基本盐培养基中,以1%蝉蜕为唯一碳氮源,在26℃,初始pH值8.0,1%的菌丝接种量。结论:本研究初步确定的贵阳腐霉的Pr2产酶条件,为该酶的进一步研究提供了有价值的参考。
2008年03期 No.132 221-224页 [查看摘要][在线阅读][下载 394K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：176 ] |[引用频次：1 ] |[下载次数：31 ] - 魏洁;龚小卫;明小燕;王旭;王达安;邓鹏;姜勇;
目的:为了研究MAPK激活蛋白激酶2(MAPK-activated protein kinase 2,MK2)细胞内定位与其功能的关系,构建了MK2不同突变体的绿色荧光蛋白融合表达载体并观察这些突变体在细胞内的定位情况。方法:将克隆在绿色荧光蛋白载体pEGFP-C2上的野生型MK2(WT)通过定点突变技术构建其无活性突变体MK2(320A)和活性突变体MK2(320E),转染NIH3T3细胞,并在荧光显微镜下观察其细胞内定位情况。结果:各种MK2不同突变体经测序鉴定正确后,在NIH3T3细胞中得到高量表达。融合蛋白发出的绿色荧光表明,在静息状态下,MK2(WT)主要分布于细胞核内,MK2(320E)主要分布于细胞质内,而MK2(320A)在细胞核和细胞质中都有分布。在受到紫外线(UV)刺激后,MK2(WT)和MK2(320A)移位出核,而MK2(320E)的细胞内定位则没有发生明显的改变。结论:成功构建了绿色荧光蛋白标记的MK2不同突变体并在真核细胞中进行了表达,观察到不同突变体对MK2细胞内定位的影响。
2008年03期 No.132 225-228页 [查看摘要][在线阅读][下载 297K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：246 ] |[引用频次：2 ] |[下载次数：136 ] - 黄薇;何常;杨婷;冉鹏;杨勤;
目的:应用组织芯片(tissue chip)-组织微阵列(tissue microarray,TMA)技术结合免疫组织化学的方法检测肺鳞癌组织中高迁移率蛋白A1(high mobility group A1,HMGA1)的表达情况,以明确HMGA1蛋白表达与肺鳞癌发生的关系及临床意义。方法:用组织阵列仪制备组织芯片,切片后采用免疫组织化学的方法检测组织芯片上25例肺鳞癌肿瘤组织和18例对照组肺组织样本中的HMGA1的表达情况,并分析其表达与各临床病理学参数之间的相关性。结果:HMGA1蛋白在肺鳞癌组和对照组的阳性表达率分别为68.0%(17/25)、16.7%(3/18),两者比较差异具有显著性(P<0.05);HMGA1阳性表达与性别、年龄无关(P>0.05),而与淋巴结转移及组织学分级有关(P<0.05)。结论:肺鳞癌的发生、发展可能与HMGA1的表达上调密切相关,HM-GA1有望成为肺鳞癌诊治中的1个新的标志物;临床上,检测HMGA1蛋白对判断肺鳞癌的预后和指导治疗可能具有一定的参考价值。
2008年03期 No.132 229-232页 [查看摘要][在线阅读][下载 197K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：200 ] |[引用频次：2 ] |[下载次数：49 ] - 段斯亮;于声;苏晓庆;
目的:实现贵阳腐霉(Pythium guiyangense Su)类枯草菌素蛋白酶(subtilisin-like protease,Pr1)基因在大肠杆菌中的活性表达,验证已获得的基因序列(YP1977)是否属于subtilisin-like protease基因家族成员。方法:(1)提取贵阳腐霉总RNA,以已获得的序列(YP1977)为模版设计引物,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增Pr1基因ORF片段;(2)构建含有Pr1基因ORF序列、绿色荧光蛋白基因ORF序列的重组质粒pTWIN1-Pr1-EGFP,转化表达菌株E.coliER2566,IPTG诱导菌株表达Pr1蛋白酶。结果:成功构建含有Pr1基因ORF序列、绿色荧光蛋白ORF序列的重组质粒pTWIN1-Pr1-EGFP,实现了Pr1基因在大肠杆菌中的活性表达。结论:证明已获得的DNA序列是贵阳腐霉的一个Pr1基因的编码区。
2008年03期 No.132 233-236+239页 [查看摘要][在线阅读][下载 301K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：266 ] |[引用频次：5 ] |[下载次数：93 ] - 姜迎海;张春林;陈汉彬;
目的:对甘肃省蚋类进行分类区系调查,初步摸清该省代表性地区蚋相本底资料。方法:选择甘肃5个不同的代表性地区,采用常规方法采集幼蚋,经隔离培养育出成虫,制片、鉴定、编制名表并进行相关讨论。结果:共采获蚋类13种,其中含有4个新种。结论:甘肃具有蚋类多样性,反映了古北界的区系特征。
2008年03期 No.132 237-239页 [查看摘要][在线阅读][下载 81K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：197 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：39 ] - 刘永军;安丽文;赵宪林;关一夫;
目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)和蛋白酶激活受体-1(PAR-1)的表达与星形细胞肿瘤病理分级的关系以及两者的相关性。方法:用半定量RT-PCR方法检测50例星形细胞肿瘤和10例正常脑组织中VEGF和PAR-1的表达水平。结果:在正常脑组织中VEGF和PAR-1的表达与星形细胞肿瘤比较差异有统计学意义;VEGF和PAR-1在星形细胞肿瘤Ⅱ级、Ⅲ级与Ⅳ级中的表达水平,差别具有统计学意义。经Spearm an等级相关分析VEGF和PAR-1两者的表达指数正相关(r=0.355,P<0.05)。结论:VEGF和PAR-1的表达与星形细胞肿瘤的侵袭性密切相关,可作为临床判断胶质瘤恶性程度、侵袭性的重要指标。
2008年03期 No.132 240-242+247页 [查看摘要][在线阅读][下载 150K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：231 ] |[引用频次：2 ] |[下载次数：53 ] - 赵国杰;郝凤进;关一夫;
目的:分析肉毒毒素E型重链(BoNT/E HC)的抗原表位及空间结构。方法:利用在线生物信息学分析工具以及其它分析软件分析重链蛋白的抗原表位和空间结构。结果:预测并显示了肉毒毒素E型重链的空间结构图,以及9个可能的重链的B细胞抗原表位,静电势图揭示了重链分子结构域的两性特点。结论:抗原表位的预测对于E型肉毒毒素相关诊疗试剂的开发有指导意义,而结构域的极性分析提示其等电点的不同可能在pH介导的穿膜中起了作用。
2008年03期 No.132 243-247页 [查看摘要][在线阅读][下载 652K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：212 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：88 ] - 洪焱;苏晓庆;
目的:建立贵阳腐霉(Pythium guiyangense Su)基因组文库以便克隆该真菌的基因特别是与灭蚊毒力有关的基因。方法:用限制性内切酶Sau3AI消化贵阳腐霉基因组DNA,同时用限制性内切酶BamHI消化质粒pBluescript SK(-),再将其去磷酸化;将基因组的酶切产物连接到载体上,再转化大肠杆菌DH5α。结果:所建贵阳腐霉的基因组文库共包含11 520个克隆。经蓝白斑筛选、PCR验证以及双酶切验证,文库平均插入片段长度为1.2 kb,覆盖率约为贵阳腐霉基因组的3倍。结论:建立了贵阳腐霉的基因组文库,可以从中克隆与贵阳腐霉灭蚊毒力有关的基因。
2008年03期 No.132 248-250页 [查看摘要][在线阅读][下载 194K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：178 ] |[引用频次：6 ] |[下载次数：94 ] - 张晴;张明明;杨健;
目的:对2005年贵阳市城镇及乡村国民中20~69岁人群的体重超重、肥胖状况进行分析和研究。方法:采集贵阳市20~69岁人群的身高和体重数据,计算人体质量指数(BMI),筛查男性、女性和城镇、乡村各年龄组超重率及肥胖率,并进行比较分析。结果:贵阳市男40~44岁、女50~54岁年龄组肥胖率最高,男60~64岁、女55~59岁年龄组超重率最高。男30~34岁、女40~49岁年龄组体重增加速度最快。30~34、35~39岁2个年龄组男性超重率大于女性(P<0.01);在45~69岁年龄段女性标准化超重率及肥胖率均大于男性(P<0.01)。45~69岁年龄段,城镇男性标准化超重率大于乡村男性(P<0.01);50~69岁年龄段城镇女性标准化超重率大于乡村女性(P<0.01)。贵阳市成年男性超重率与肥胖率均低于全国水平(P<0.01)。结论:贵阳市男性30岁、女性40岁起就要注意监控体重。45岁后女性比男性肥胖,城镇人比乡村人肥胖。贵阳市成年男性肥胖状况优于全国水平。
2008年03期 No.132 251-254+258页 [查看摘要][在线阅读][下载 193K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：181 ] |[引用频次：4 ] |[下载次数：58 ] - 张彬;王全胜;朱锐;汪永辉;张丽晓;徐敏;刘建国;
目的:研究姜黄素在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型中能否减少肾间质中转化生长因子β1(trans-forming growth factor-β1,TGF-β1)和结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的表达。方法:将30只大鼠随机分为3组,每组10只:假手术组、模型组、姜黄素组。模型组和姜黄素组行右侧输尿管接扎术,假手术组只游离不接扎。术后第14天处死各组中的大鼠,检测血液尿素氮(BUN)、血清肌酸酐(Scr)。用免疫组织化学方法测定TGF-β1、CTGF的表达情况,同时采用Masson染色,观察肾脏病理情况。结果:姜黄素降低了BUN、Scr的含量,同时姜黄素显著减少了大鼠肾间质TGF-β1、CTGF的表达,并有效改善了肾脏的病理学损伤。结论:姜黄素可以减少输尿管梗阻后TGF-β1、CTGF的表达,从而改善UUO所致的肾脏损伤,提示姜黄素可能有延缓慢性肾脏疾病纤维化进程的潜能。
2008年03期 No.132 255-258页 [查看摘要][在线阅读][下载 241K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：226 ] |[引用频次：2 ] |[下载次数：105 ] - 石明隽;罗化;肖瑛;郭兵;张国忠;
目的:探讨阿魏酸钠(SF)对高糖诱导下原代肾小球系膜细胞(GMC)增殖的作用及其机制。方法:原代培养肾小球系膜细胞,分为正常组、甘露醇组、高糖组、高糖加不同浓度SF组,分别于处理后24 h、48 h收集细胞。用4-甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;免疫细胞化学检测p53和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的表达。结果:48 h内,高糖促进GMC增殖并上调p38MAPK蛋白的表达,抑制p53的表达,SF能明显对抗高糖的这种作用,其作用随SF浓度的增加、作用时间的延长而加强。结论:SF可能是通过抑制p38MAPK通路,促进p53的合成,从而抑制高糖诱导的GMC增殖。
2008年03期 No.132 259-262页 [查看摘要][在线阅读][下载 195K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：195 ] |[引用频次：1 ] |[下载次数：96 ] - 袁平;潘扬;
目的:研究细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)在脂蛋白(a)[Lp(a)]诱导的人血管平滑肌细胞(VSMC)迁移及细胞骨架构建中的作用。方法:用不同浓度的ERK激酶抑制剂PD98059抑制人VSMC内ERK的活化,再用Lp(a)诱导处理后的细胞,Western blot检测P-ERK的表达,激光共聚焦显微镜观察细胞骨架构建变化,迁移试验观察VSMC迁移数量的变化。结果:Western blot检测显示PD98059的终浓度在10μmol/L时,P-ERK表达无明显变化(P>0.05),从20~40μmol/L,随其终浓度的逐渐升高,P-ERK的表达逐渐降低(P<0.01),达到40μmol/L后,其抑制作用达到高峰。PD98059预处理人VSMC,Lp(a)诱导20 min后,细胞内未见明显的张力纤维、粘着斑及丝状伪足。对照组VSMC迁移细胞数为(78.87±7.43)个,PD98059处理组为(49.20±6.47)个,PD98059处理组较正常对照组明显减少(P<0.01)。结论:Lp(a)诱导的VSMC细胞骨架构建及细胞迁移依赖于ERK的活化。
2008年03期 No.132 263-266+269页 [查看摘要][在线阅读][下载 274K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：183 ] |[引用频次：0 ] |[下载次数：80 ] - 李远慧;李娜;
目的:探讨I型跨膜糖蛋白(Fas)在砷中毒大鼠肾小球细胞表达的影响。方法:复制砷中毒大鼠模型,测血砷、尿砷,免疫组织化学SABC方法检测肾小球细胞Fas的表达,并图像分析计数。结果:慢性砷中毒高剂量组(25.6±3.99)和低剂量组(8.76±2.15)肾小球细胞Fas表达较对照组(1.30±1.57)明显增多,P<0.01。结论:慢性砷中毒使肾小球细胞Fas表达明显增加,提示Fas可能参与慢性砷中毒肾小球细胞凋亡的调控。
2008年03期 No.132 267-269页 [查看摘要][在线阅读][下载 188K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：205 ] |[引用频次：3 ] |[下载次数：67 ] - 裴华;龙世棋;左丽;
目的:研究胎盘多肽注射液对人脐静脉内皮细胞(ECV-304)增殖的影响。方法:采用细胞计数和MTT法观察不同稀释度胎盘多肽作用72 h后,ECV-304细胞增殖情况。同时以免疫组织化学法检测不同稀释度胎盘多肽对ECV-304细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。结果:一定稀释度的胎盘多肽可促进ECV-304细胞的增殖,25 ml/L即可发挥作用,200 ml/L作用最明显。ECV-304细胞PCNA表达阳性率与胎盘多肽稀释度呈剂量相关性。结论:胎盘多肽可促进体外培养的ECV-304细胞增殖。
2008年03期 No.132 270-271+277页 [查看摘要][在线阅读][下载 87K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：243 ] |[引用频次：3 ] |[下载次数：140 ] - 赵平;李勇军;何迅;王爱民;王永林;
目的:建立荭草素和异荭草素对照品的制备方法。方法:用萃取、硅胶柱层析、重结晶等方法对荭草水提取物进行分离纯化,通过MS、IR、1HNMR1、3CNMR对其分离产物进行结构鉴定。结果:薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)检测分析,荭草素和异荭草素的纯度分别为98.03%和98.26%。结论:本方法简便,产品纯度高,该对照品可作为控制荭草及其制剂质量的指标成分。
2008年03期 No.132 272-274+277页 [查看摘要][在线阅读][下载 314K] [网刊下载次数：0 ] |[阅读次数：217 ] |[引用频次：6 ] |[下载次数：359 ]