张强,罗彩云,孙达权,曾志锐,郑志菊,徐国强

摘要(Abstract)：

目的 探究Nedd4家族交互作用蛋白2(Ndfip2)对人肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法 采用免疫组织化学En Vision染色法和蛋白印迹法检测Ndfip2在肝癌组织和和肝癌细胞SMMC-7721、Hep G2中的表达;在SMMC-7721和Hep G2细胞中转染靶向Ndfip2小干扰RNA(si-Ndfip2)和无义siRNA序列分别构建Ndfip2基因沉默(si-Ndifip2)组和阴性对照(NC),蛋白印迹检测转染效率;采用划痕、Transwell以及形态学观察检测NC和si-Ndifip2组细胞的迁移、侵袭以及形态学变化,蛋白印迹法检测上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白表达的影响。结果 与癌旁组织比较,肝癌组织中Ndfip2表达显著上调(P <0. 05);与正常肝细胞LO2细胞比较,肝癌细胞SMMC-7721和Hep G2细胞中Ndfip2表达均明显上调(P <0. 01); Ndfip2 si-RNA转染SMMC-7721和Hep G2细胞后,Ndfip2蛋白表达均明显下调(P <0. 01);划痕实验、Trasnwell实验和形态学观察结果表明,与NC组比较,si-Ndifip2组SMMC-7721和Hep G2细胞迁移和侵袭能力均明显减弱(P <0. 01),细胞形态上皮样转化;蛋白印迹法检测显示,与NC组比较,si-Ndifip2组SMMC-7721和Hep G2细胞中N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平均下降(P <0. 05),而E-cadherin蛋白表达则增加(P <0. 05)。结论 沉默Ndfip2基因可以抑制肝癌细胞的迁移、侵袭能力,其机制可能与EMT过程有关。

关键词(KeyWords)： 肝肿瘤细胞;Nedd4家族交互作用蛋白2;迁移;侵袭;上皮间质转化

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作者(Author): 张强,罗彩云,孙达权,曾志锐,郑志菊,徐国强

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