不同品系小鼠侵袭性真菌感染动物模型的构建
王迪,黄劲,姚昌昊,王梅竹,程敏,郭鑫瑶,廖万清,康颖倩
摘要(Abstract)：
目的 探讨不同品系小鼠侵袭性真菌感染动物模型的构建方法。方法 取白念珠菌ATCC10231T菌株(标准菌株)、GYWu27菌株[临床艾滋病(AIDS)病人来源)、GYF76菌株[临床外阴阴道念珠菌病(VVC)病人来源]、N110菌株(健康人来源)及新生隐球菌H99T菌株(标准菌株)培养至对数生长期,离心重悬于无菌盐水中,采用分光光度法及细胞计数板调整菌液浓度至所需浓度; 4～6周龄SPF级KM小鼠和Balb/c小鼠各30只,随机均分为5组,分别注射浓度1×106、1×107、1×108、1×109及1×1010CFU/L白念珠菌ATCC10231T菌株,观察14 d内小鼠的死亡速率筛选侵袭性真菌感染的最适浓度;取4～6周龄SPF级KM小鼠和Balb/c小鼠各50只,随机均分为GYWu27组、GYF76组、N110组、H99T组及生理盐水(Saline)组,各菌株感染组小鼠经侧尾静脉注射最适浓度菌液感染、Saline组小鼠注射Saline,记录各组小鼠30 d内的一般状态、体质量及90 d内的生存情况;取GYWu27组、GYF76组及N110组死亡小鼠的肾脏、H99T组小鼠脑组织及定期分批处死的Saline组小鼠肾脏和脑组织分别制作组织匀浆、稀释后接种于含0. 05%氯霉素葡萄糖琼脂培养基(SDA)、检测肾脏和脑组织的真菌负荷量,接种于SDA、酵母浸出粉胨葡萄糖培养基(YPD)鉴定分离后菌株;取GYWu27组、GYF76组、N110组两种系小鼠肾脏、肝脏及H99T组两种系小鼠的肾脏、肝脏及脑组织,制作组织切片,观察组织学特征。结果 侵袭性真菌感染动物模型Balb/c小鼠和KM小鼠的最适感染浓度分别为1×108CFU/L和1×109CFU/L;相同实验条件下,感染后KM小鼠一般状态较Balb/c小鼠好,白念珠菌及新生隐球菌感染的KM小鼠30 d内的体质量变化明显;白念珠菌和新生隐球菌体外培养菌株及感染小鼠体内分离菌株的培养特性无差异;白念珠菌感染的Balb/c小鼠靶器官真菌负荷量明显高于KM小鼠;新生隐球菌感染小鼠病变集中于脑组织,白念珠菌感染小鼠病变集中在肾脏。结论 采用静脉感染方式、以1×108CFU/L白念珠菌和1×109CFU/L新生隐球菌分别感染Balb/c小鼠和KM小鼠,可构建稳定的侵袭性真菌感染动物研究模型。
关键词(KeyWords)：
念珠菌,白色;隐球菌,新型;动物模型;真菌感染;KM小鼠;Balb/c小鼠
基金项目(Foundation):
作者(Author):
王迪,黄劲,姚昌昊,王梅竹,程敏,郭鑫瑶,廖万清,康颖倩
参考文献(References)：
文章评论(Comment)：
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