邓思波,黄敏慧,张迎春,吴建伟,崔古贞,陈峥宏,王涛

摘要(Abstract)：

目的 探讨家蝇抗真菌肽-1A(MAF-1A)体外抗白念珠菌(C. albicans)的细胞内作用机制。方法 取C. albicans冻存物划线接种、培养并制备浓度为2×109cfu/L的菌悬液;分别以0、625、1 250及2 500 mg/L的MAF-1A作用24 h,采用荧光指示剂法检测各处理细胞内活性氧(ROS)含量的变化;取0、781及1 560 mg/L抗氧化剂维生素C(Vc)和还原型谷胱甘肽(GSH))预处理C. albicans细胞30 min,采用微量稀释法检测MAF-1A抗C. albicans的最小抑菌浓度(MIC);采用荧光指示剂法检测0、625、1 250及2 500 mg/L的MAF-1A作用24 h后C. albicans细胞线粒体膜电位的变化;取C. albicans脱氧核糖核酸(DNA)与等体积不同浓度(0、625、1 250及2 500 mg/L) MAF-1A共孵育6 h,采用琼脂糖凝胶阻滞实验分析MAF-1A对C. albicans DNA的影响。结果 与0 mg/L MAF-1A相比,不同浓度MAF-1A处理C. albicans细胞内ROS量明显增加(P <0. 01),且胞内ROS的含量随着MAF-1A处理浓度的增加而增加,呈剂量依赖性; VC和GSH处理后,MAF-1A抗C. albicans的MIC值由625 mg/L升高至1 250 mg/L; MAF-1A处理后,C. albicans细胞线粒体的膜电位未出现变化(P> 0. 05);凝胶阻滞实验结果显示,不同浓度MAF-1A与C. albicans DNA孵育后,DNA条带出现滞后及变暗淡现象,且在加样孔有滞留,这种阻滞现象随着MAF-1A浓度升高越明显。结论 MAF-1A不仅能诱导C. albicans细胞内大量产生ROS,还能通过与DNA的结合而发挥对C. albicans的抑制作用。

关键词(KeyWords)： 抗菌肽类;念珠菌,白色;抗氧化剂;膜电位,线粒体;家蝇抗真菌肽-1A;活性氧;DNA凝胶阻滞

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作者(Author): 邓思波,黄敏慧,张迎春,吴建伟,崔古贞,陈峥宏,王涛

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