平足蛋白表达与OSCC患者临床特征的关系及其对CAL?27细胞株增殖和迁移的作用机制
金城
摘要(Abstract):
目的 探讨平足蛋白(podoplanin)表达与口腔鳞状细胞癌(OSCC)患者临床特征的关系及其对OS?CC CAL?27细胞株增殖和迁移的作用机制。方法 选取OSCC患者组织标本76例,采用免疫组织化学染色法检测组织中Podoplanin含量,据Podoplanin染色阳性细胞数量和色彩深浅综合得分分为Podoplanin低表达组(≤1分)和高表达组(>1分),收集2组患者的临床特征资料和预后信息,采用χ2检验、Kaplan?Meier法及时序检验分析2组患者临床特征和预后的差异;使用Podoplanin si?RNA及质粒转染处理人OSCC细胞CAL?27,设置空白组、空白沉默(空白过表达)组及沉默(过表达)组, Western blot及实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)验证沉默及过表达效果后将细胞分为对照组、沉默组及过表达组,采用噻唑蓝比色法(MTT)法检测各组细胞12、24及48 h的增殖能力,采用细胞集落形成实验检测各组细胞培养48 h的细胞集落形成率,采用流式细胞仪和Tran?swell法检测24 h各组细胞周期和细胞迁移能力,采用Western blot法检测对各组细胞中磷脂酰肌醇3?激酶/蛋白激酶B(AKT)信号通路相关蛋白的表达。结果 免疫组织化学染色结果显示,低分化OSCC患者口腔癌组织Podoplanin染色阳性细胞数多于高分化患者;低分化及淋巴结转移组OSCC患者的Podoplanin高表05),高表达组OSCC患者的总生存期(OS)低于低表达组(P<005);与对照组比较,沉默组CAL?27细胞中Podoplanin蛋白及mRNA表达下降、而在过表达组表达升高(P<0对照组相比,Podoplanin过表达组CAL?27细胞24 h时细胞增殖明显,而48 h时沉默组细胞增殖及集落形成能力
关键词(KeyWords):
细胞增殖;平足蛋白;总生存期;口腔鳞状细胞癌;迁移;机制
基金项目(Foundation):
作者(Author):
金城
参考文献(References):
文章评论(Comment):
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