夏晓枫,车彪,覃松,刘骏,罗斌

摘要(Abstract)：

目的 探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)基因敲除小鼠椎间盘软骨组织中胶原的动态变化。方法 取30只Col2-CreSIRT1co/co(SIRT1+/+)小鼠均分为正常组及模型组,另取15只SIRT1+/+小鼠腹腔注射他莫昔芬获SIRT1-/-小鼠作为试验组,模型组、试验组手术建立椎间盘突出模型,正常组仅给予假手术操作;术后第4周时,采用Western blot法和实时定量PCR法检查3组小鼠椎间盘软骨组织中SIRT1蛋白及m RNA的表达水平,并行HE染色及X线片检查观察小鼠椎间盘软骨组织学变化,采用免疫组织化学法检查术后第4、8及12周时3组小鼠椎间盘软骨组织中Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅱ型胶原(ColⅡ)及Ⅹ型胶原(Col X)的表达水平。结果 HE染色结果显示术后第4周,正常组小鼠椎间盘纤维结构清晰、层次分明,模型组小鼠纤维环排列欠完整、髓核细胞数目有所减少,试验组小鼠椎间盘纤维环明显紊乱,髓核细胞明显减少; X线片结果显示,正常组和试验组小鼠颈椎和腰椎段生理前凸角度均较模型组大; Western blot法和实时定量PCR检测椎间盘软骨组织的STRI1表达结果显示,与正常组、模型组相比,试验组的SIRT1蛋白及m RNA水平下降(P <0. 05);术后第8周及12周时,3组小鼠椎间盘软骨组织ColⅠ、Col X蛋白水平均高于术后第4周、ColⅡ均低于术后第4周(P <0. 05);同时点比较,正常组小鼠各时点ColⅠ和Col X均低于模型组和试验组(P <0. 05),试验组ColⅠ和Col X均高于模型组(P <0. 05),ColⅡ低于模型组(P <0. 05)。结论 敲除椎间盘模型小鼠的SIRT1基因会使小鼠软骨组织中的ColⅠ、Col X水平升高和ColⅡ水平降低。

关键词(KeyWords)： 基因敲除技术;椎间盘;胶原;基因表达;沉默信息调节因子1;退变

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作者(Author): 夏晓枫,车彪,覃松,刘骏,罗斌

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