mTORC1TFEB信号通路对肝脏缺血再灌注损伤模型大鼠肝细胞线粒体结构和肝功能的影响
唐天豪,张莹,吕宗伟,胡玉香,黄平,张玉,潘宁波
摘要(Abstract):
目的 探讨 mTORC1TFEB信号通路对肝脏缺血再灌注损伤模型大鼠肝细胞线粒体结构及肝功能的影响。方法 36只 SD雄性大鼠随机均分为对照组、模型组及药物组,药物组大鼠术前 3d注射雷帕霉素溶液[2.0mL/(kg·d)]、对照组和模型组大鼠注射等体积生理盐水,药物组和模型组大鼠麻醉后开腹夹闭第一肝门再放开制作肝缺血再灌注损伤模型、对照组大鼠仅手术但不夹闭肝门,分别在术后 24h、72h取大鼠肝脏组织
HE染色观察肝脏组织细胞损伤程度,透射电镜分析肝细胞线粒体的超微结构变化,比色法检验肝脏组织谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)浓度水平,蛋白印迹实验(Westernblot)和实时荧光 PCR(RTPCR)检测磷酸化mTORC1(p-mTORC1)和转录因子 EB(TFEB)蛋白和 mRNA表达。结果 HE染色结果显示,对照组肝脏组织细
胞在术后各个时间点未见明显异常(P>0.05),而药物组大鼠肝脏损伤程度在各个时间点均较模型组轻(P<0.05),药物组和模型组术后 72h肝损伤的程度较术后 24h减轻(P<005);透射电镜结果显示,在各个时间点,对照组线粒体的超微结构形态正常,药物组线粒体超微结构损伤均较模型组轻,药物组和模型组术后 72h线粒体损伤程度较术后 24h减轻;术后 24h及 72h,药物组及模型组 AST、ALT表达水平高于对照组,且模型组高于药物组(P<0.05),药物组及模型组 p-mTORC1的蛋白和 mRNA表达水平低于对照组、而 TFEB的蛋白和mRNA表达水平高于对照组,且药物组 pmTORC1的蛋白和 mRNA表达水平低于模型组、而 TFEB的蛋白和 mRNA表达水平高于模型组(P<0.05),术后 72h药物组及模型组的 AST、ALT和 TFEB相关表达水平较术后 24h降低,而 p-mTORC1相关表达水平较术后 24h升高(P<0.05)。结论 mTORC1TFEB信号通路对肝脏缺血再灌注损伤模型大鼠有保护作用,其机制可能与减轻线粒体损伤、改善肝功能有关。
关键词(KeyWords):
mTORC1;TFEB;线粒体;电镜;肝脏;缺血再灌注损伤
基金项目(Foundation):
作者(Author):
唐天豪,张莹,吕宗伟,胡玉香,黄平,张玉,潘宁波
参考文献(References):
文章评论(Comment):
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