论著

  • 绿色荧光标记C-反应蛋白的原核表达和毛细管电泳检测

    陈腾祥;夏高晓;陈丽;刘亚伟;刘靖华;姜勇;

    目的:表达纯化重组的His-EGFP-CRP蛋白,通过毛细管电泳技术对该重组蛋白的生物活性进行评价。方法:用pET14b/EGFP-hCRP原核表达质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,表达的重组蛋白通过亲和色谱纯化、梯度透析,获得复性的His-EGFP-CRP蛋白;并用高效毛细管电泳(HPCE)技术对复性的蛋白进行检测,了解蛋白质的等电点及活性。结果:转化实验发现,该质粒pET14b/EGFP-hCRP在BL21(DE3)中能够被诱导表达;通过包涵体变性溶解、亲和色谱纯化可获得纯度较高的His-EGFP-CRP蛋白;HPCE分离发现复性后的His-EGFP-CRP蛋白峰为多个,其在电泳液pH值低于6时易检出,His-EGFP-CRP与THP-1细胞裂解物孵育后的检测峰增多。结论:成功地在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达重组蛋白His-EGFP-CRP,通过包涵体变性溶解及亲和色谱纯化获得该重组蛋白,复性后的His-EGFP-CRP等电点接近于6,以单体或多聚体等结构形式存在,具有结合活性,能与细胞内相关分子结合成复合物,可应用于CRP功能和内化机制的研究。

    2008年05期 No.134 441-445页 [查看摘要][在线阅读][下载 707K]
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  • 口腔鳞癌中白细胞介素-8的表达及临床意义

    冯红超;彭玉峰;宋宇峰;

    目的:了解口腔鳞癌(oral squam ous-cell carcinoma,OSCC)组织中白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)的表达情况,并探讨其与肿瘤发展和转移的关系。方法:应用免疫组织化学SP法检测40例OSCC和10例正常口腔黏膜中IL-8的表达,并分析其表达和临床指标的关系。结果:OSCC中IL-8的表达显著高于正常口腔黏膜组(P<0.05),其阳性表达率分别为67.50%和30.00%;在OSCC中IL-8的表达Ⅲ~Ⅳ期病例显著高于Ⅰ~Ⅱ期病例(P<0.05),有淋巴结转移组显著高于无淋巴结转移组(P<0.05)。结论:OSCC中IL-8的高表达参与了肿瘤的生长和转移,但具体的机制及其在OSCC预后、治疗中的意义还需进一步的研究。

    2008年05期 No.134 446-448+452页 [查看摘要][在线阅读][下载 209K]
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  • 间充质干细胞定向诱导为内皮细胞的体外研究

    杨思远;赁可;石应康;陈焕文;蒙炜;

    目的:为寻找心血管组织工程新的种子细胞来源,探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的体外培养方法和向血管内皮细胞分化的能力。方法:利用淋巴细胞分离液分离出MSCs,并体外扩增,激光共聚焦显微镜检测表面抗原表达,以含血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维生长因子(bFGF)的诱导分化培养液定向诱导传代使其向血管内皮细胞方向分化,观察细胞形态的变化,检测内皮细胞特异性标志物的表达。结果:MSCs在体外传代扩增后激光共聚焦显微镜检测结果显示CD44、CD90表达阳性,CD31、CD45为阴性,分化后细胞具有内皮细胞的形态学特征,并表达内皮细胞特异性标志物CD31。结论:骨髓间充质干细胞可在体外诱导向内皮细胞方向分化。

    2008年05期 No.134 449-452页 [查看摘要][在线阅读][下载 261K]
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  • 人牙周膜细胞在双氧水处理后纯钛表面的活性

    侯豫;王永;张丽;吴承龙;

    目的:研究双氧水法处理纯钛表面应用于口腔临床的可行性。方法:倒置显微镜观察细胞原代及传代的生长情况,扫描电镜观察细胞在4种钛片上的附着形态,从形态学、免疫组织化学及细胞增殖、活性方面对比细胞在4种钛片上的异同。结果:人牙周膜细胞在4种钛片上都可以生长及增殖,但其在双氧水处理的钛片上的增殖高于其他3组(P<0.05)。结论:4种处理钛片的方法中,双氧水法更有利于人牙周膜细胞的附着及增殖。细胞在4种钛片上都表现出了碱性磷酸酶(ALP)活性,而且处于稳定后双氧水组的ALP活性最高(P<0.05)。

    2008年05期 No.134 453-458页 [查看摘要][在线阅读][下载 1214K]
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  • 荭叶心通软胶囊对大鼠的长期毒性研究

    何迅;李勇军;周雯;王爱民;兰燕宇;王永林;

    目的:观察荭叶心通软胶囊对大鼠的长期毒性。方法:160只SD大鼠,随机分为高、中、低剂量组及空白对照组,雌雄各半,每日灌胃1次,连续给药26周,观察大鼠的一般状况、体重、摄食量和给药13、26周及停药后4周大鼠的血液学、血液生化学、凝血功能、脏器系数、解剖学及病理组织学改变的情况。结果:荭叶心通软胶囊高剂量组雌性大鼠给药13周总胆红素(TBIL)、给药26周肌酐(CREA)和TBIL、给药26周凝血酯原时间(PT)及高剂量组雄性大鼠给药26周Cl-浓度与对照组比较稍有差异,停药4周后即恢复正常,组织病理学检查无异常。其余各剂量组各项指标与对照组比较差异均无显著性。结论:荭叶心通软胶囊在临床剂量范围内毒性小,使用安全。

    2008年05期 No.134 459-461+464页 [查看摘要][在线阅读][下载 340K]
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  • 蜂房提取物对荷瘤鼠放化疗的增效作用

    魏金荣;张坤;关一夫;张岐山;

    目的:观察蜂房乙醇提取物对荷H22肝癌小鼠的放化疗增效作用。方法:移植H22肝癌的小鼠模型,给予蜂房乙醇提取物与化疗和放疗联合,计算抑瘤率及增效率。结果:蜂房乙醇提取物对荷H22肝癌小鼠放化疗的抑瘤率分别达60.5%和61.2%,增效率分别为33.3%和32.6%。结论:蜂房乙醇提取物对荷H22肝癌小鼠的放化疗均有明显的增效作用。

    2008年05期 No.134 462-464页 [查看摘要][在线阅读][下载 91K]
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  • 体外培养人牙周膜细胞方法的探讨

    张丽;王永;张军梅;侯豫;吴承龙;王文秀;

    目的:研究如何提高体外培养人牙周膜细胞(hPDL)的成功率,为简便、快速地获得大量成活率高的hPDL膜细胞,建立体外细胞模型提供一定的实验方法。方法:利用3种不同方法(组织块法、酶消化组织块法、全牙消化法)进行牙周膜细胞的原代培养,用形态学、免疫细胞化学染色等方法鉴定细胞来源;通过生长曲线的测定研究体外细胞生长特性。结果:3种方法获得的细胞形态和生物学行为大致相同;波丝蛋白抗体染色阳性,角蛋白抗体染色阴性。组织块法培养的细胞同源性好,但初代培养时间长;全牙消化法的原代培养成功率高于其他2种方法。结论:通过对牙周膜细胞培养方法的改良,可以显著提高hPDL原代培养的成功率。

    2008年05期 No.134 465-468页 [查看摘要][在线阅读][下载 339K]
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  • 气相色谱法测珍珠滴丸中冰片含量及稳定性研究

    马琳;王永林;王爱民;兰燕宇;李勇军;何迅;

    目的:建立气相色谱测定珍珠滴丸中冰片含量的方法,并用该方法对制剂中冰片的稳定性进行研究。方法:以FFAP大口径石英毛细管柱(30m×0.53mm,0.5μm)为色谱柱,高纯氮气(99.999%)为载气;柱前压20kPa,柱温130℃,进样口温度220℃,氢火焰离子化检测器温度250℃;氢气(99.99%)流量为40ml/min,空气流量为400ml/min。结果:龙脑在0.25~0.75g/L线性关系良好,r=0.9999,加样回收率为99.33%,RSD为1.4%。结论:气相色谱法可作为珍珠滴丸的质量控制方法;制剂中冰片在30℃以下放置基本稳定,应避免高温环境。

    2008年05期 No.134 469-471页 [查看摘要][在线阅读][下载 181K]
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  • 标准稀释法测定生化需氧量中稀释水的影响因素

    张震;金庭旭;张华;方世杰;

    目的:旨在寻找生化需氧量(BOD)标准稀释法测定中稀释水的一些影响因素,提高测定的灵敏度与准确度,为今后的教学研究提供一定的参考。方法:分别以不同水源、不同曝气平衡时间、不同温度为研究条件测试稀释水的5d生化过程所消耗的氧量(BOD5),以确定最佳实验条件。结果:以蒸馏水和纯净水作为稀释水水源,其BOD5都小于0.2mg/L,均达到标准;平衡时间增长,当日溶解氧量趋于降低,与标准值的差值也逐渐增大,未经平衡的溶解氧量接近饱和;20℃时的测定结果达标。结论:以经济实用的蒸馏水为稀释水水源,在20℃恒温实验室进行测定,并在水样采集、稀释过程中严格遵守操作步骤,避免气泡的产生。

    2008年05期 No.134 472-474+477页 [查看摘要][在线阅读][下载 112K]
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  • 荭叶心通软胶囊成型工艺研究

    苏红;刘志宝;周雯;王永林;兰燕宇;

    目的:确定荭叶心通软胶囊的最佳成型工艺。方法:采用单因素平行试验的方法,对辅料及其用量、囊材、制片温度等进行了成型工艺筛选。结果:最佳工艺是以适量的大豆油作为混悬剂,并加入助悬剂蜂蜡(2%),先熔融在大豆油中,冷至室温后,加入挥发油混匀,再将干膏粉加入混合油充分研磨混匀(比例为1∶0.5~1∶0.75),采用明胶∶甘油∶水(质量比1∶0.4∶1)为囊材,融胶温度在70~80℃、保温温度在55~65℃时制成软胶囊。结论:此成型工艺合理、稳定,操作简单,适用于大规模生产。

    2008年05期 No.134 475-477页 [查看摘要][在线阅读][下载 77K]
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  • 中药复方脂肝乐抗大鼠脂肪肝的作用

    叶兰;熊陶;黄能慧;

    目的:观察中药复方脂肝乐(ZGL)对高脂饲料所致大鼠脂肪肝的治疗作用,并探讨其作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为6组,除正常组外,其余各组均给予高脂饲料,连续12周,第13周开始,ZGL灌胃给药,持续12周。实验结束处死动物,检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇含量(T-CH);肝脏TG、T-CH、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量;肝脏病理检查,观察显微结构变化。结果:ZGL能显著降低血清T-CH、TG含量,降低肝脏T-CH、TG、MDA含量(P<0.01,P<0.05);升高肝脏GSH含量(P<0.01,P<0.05),病理学变化可得到明显改善。结论:脂肝乐有明显抗脂质过氧化、促进脂质从肝脏排除、减少脂质在肝内蓄积的作用,具有显著抗脂肪肝作用。

    2008年05期 No.134 478-480+484页 [查看摘要][在线阅读][下载 149K]
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  • 具有抗肿瘤活性的胡萝卜脂溶性成分研究

    荆晶;杨若林;陆阳;

    目的:对胡萝卜脂溶性部位的化学成分进行研究,以期从中分离出具有抗肿瘤活性的单体化合物。方法:胡萝卜提取采用溶剂萃取、薄层色谱、柱色谱、高效液相色谱等化学方法,结构鉴定采用测定理化常数、1H-NMR、13C-NMR、紫外等方法。结果:从胡萝卜的脂溶性部位分离得到3个化合物:β-谷甾醇、Laserine、Epilas-erine,其中Epilaserine对白血病细胞HL-60有显著的抑制活性,Laserine、Epilaserine系从胡萝卜中提取得到。结论:胡萝卜中的Laserine、Epilaserine具有抗肿瘤活性。

    2008年05期 No.134 481-484页 [查看摘要][在线阅读][下载 310K]
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  • 高效液相色谱法测定兔血浆中黄芩苷的含量

    蒋蒨;王鹏娇;张敏;高秀丽;

    目的:建立测定兔血浆中黄芩苷的含量测定方法。方法:用PEG400-2%偏磷酸沉淀血浆蛋白,离心后取上清液进行色谱分析。色谱柱为Diamosil-C18,流动相为乙腈-0.1%磷酸(25∶75,V/V),流速为1ml/min,检测波长275nm。结果:黄芩苷的质量浓度在0.08722~2.9075mg/L(r=0.9899);低、中、高3个浓度的质量控制(QC)样品的相对回收率分别为96.3%、97.3%和96.6%。结论:方法简便快速,适用于黄芩苷的血药浓度测定及药代动力学研究。

    2008年05期 No.134 485-487页 [查看摘要][在线阅读][下载 169K]
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  • 双歧杆菌及灵芝孢子对胃肠菌群失调的预防

    龙世棋;左丽;陈阿英;崔冬冰;钟志强;

    目的:探讨双歧杆菌、赤灵芝孢子及其联合制剂对小鼠胃肠菌群失调的预防作用,为临床用药提供实验依据。方法:用不同剂量双歧杆菌、灵芝孢子粉及其联合制剂灌胃7d,然后林可霉素连续灌胃7d,计数直肠成型粪便菌落。结果:(1)各预防组需氧及厌氧菌落数均明显高于菌群失调组(P<0.01);(2)双歧高剂量组需氧菌落数较正常对照组差异无显著性(P>0.05);(3)灵芝孢子高剂量组厌氧菌落数较正常对照组差异无显著性(P>0.05);中、低剂量组需氧菌落数较正常对照组差异无显著性(P>0.05);(4)联合制剂高剂量组厌氧菌落数较正常对照组差异无显著性(P>0.05)。结论:双歧杆菌、赤灵芝孢子、联合制剂有一定预防菌群失调作用。

    2008年05期 No.134 488-490+494页 [查看摘要][在线阅读][下载 118K]
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  • 二甲双胍联合吡格列酮治疗非酒精性脂肪性肝病

    李桂平;李红卫;彭娜;李绪娴;钟思干;

    目的:观察二甲双胍及吡格列酮对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的治疗效果。方法:136例NAFLD患者,随机分为对照组、二甲双胍治疗组、吡格列酮治疗组、联合治疗组。疗程6月,比较各组治疗前后的体重指数(BMD)、腰臀比(WHR)、血压、血脂、肝酶学、肿瘤坏死因子(TNF-α)、空腹血糖(FPG)、空腹血胰岛素(FINS)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。记录症状、体征、肝脏B超和CT表现。结果:药物治疗组患者的血总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、谷丙转氨酸(AST)、谷草转氨酶(ALT)、r-谷氨酞转移酶(GGT)、HOMA-IR均较治疗前明显改善,TNF-α明显下降(P<0.05),总有效率明显高于对照组(P<0.01)。二甲双胍治疗组与吡格列酮治疗组疗效相近,合并应用二者的疗效显著优于单独应用二甲双胍或吡格列酮治疗的效果。结论:二甲双胍与吡格列酮均对NAFLD的治疗安全有效,联合用药效果优于单药治疗。

    2008年05期 No.134 491-494页 [查看摘要][在线阅读][下载 133K]
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研究简报

文摘

  • 根癌农杆菌介导灭蚊卵菌贵阳腐霉的遗传转化(英文)

    赵竟男;苏晓庆;

    Pythium guiyangense is a mosquito pathogen,and has been proved to be a promising agent for biological control of mosquitoes.In order to develop the strains adaptable to different ecological environment having stable virulence to mosquito larvae,and being able to prolong the shelf life,an effort was made on transforming the fungus by using homologous or heterologous virulence genes.In this paper,a genetic transformation experiment of P.guiyangense mediated by Agrobacterium tumefaciens is reported.As a result,an A.tumefaciens mediated genetic transformation system was established successfully.

    2008年05期 No.134 524页 [查看摘要][在线阅读][下载 27K]
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研究简报

研究简报

教学法研究

技术与方法

护理学

个案报道

个案报道