贵州医科大学学报

2017, (05) 497-502

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RTCA技术检测NK细胞联合西妥昔单抗对结直肠癌细胞的杀伤效应

孔娟;龙世棋;王念雪;王代琴;刘尧翠;赵星;

摘要(Abstract):

目的:利用实时无标记细胞分析技术(RTCA)检测NK细胞介导的抗体依赖细胞介导的细胞毒(ADCC)作用。方法:采用Ficoll密度梯度离心法分离正常外周血的单个核细胞(PBMC),PBMC在体外经K562工程细胞及细胞因子诱导活化扩增为NK细胞(14 d),采用流式细胞仪检测NK细胞表面分子及分析其纯度,采用RTCA技术及乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测NK细胞毒作用,RTCA检测NK细胞联合西妥昔单抗对结直肠癌细胞株杀伤作用。结果:流式细胞结果显示,经过14 d体外扩增培养后NK细胞的纯度可达86.2%;NK细胞毒作用结果显示,随着效靶比的增加(1∶1、5∶1、10∶1),LDH和RTCA检测NK细胞的杀伤作用趋势基本一致;RTCA结果显示NK细胞联合西妥昔单抗对结直肠癌细胞株杀伤作用明显高于单一的NK细胞组。结论:RTCA技术为检测NK细胞介导的ADCC作用提供了一种简便、动态及灵敏的新方法。

关键词(KeyWords): 实时无标记细胞分析;自然杀伤细胞;细胞毒性;西妥昔单抗;结直肠肿瘤

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 孔娟;龙世棋;王念雪;王代琴;刘尧翠;赵星;

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