贵州医科大学学报

2017, (02)

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大鼠主动脉血管平滑肌细胞原代培养与鉴定

刘姿麟1,林慕之1,况春燕1,2,刘兴德3

摘要(Abstract):

目的:建立一种可行的原代血管平滑肌细胞(VSMC)培养方法。方法:严格无菌操作环境下取大鼠胸主动脉及腹主动脉中层组织,通过组织块贴壁法进行原代培养,胰酶消化法进行传代,应用倒置相差显微镜对不同培养时间的细胞进行形态学观察,使用免疫荧光法对培养细胞进行鉴定。结果:原代培养第4~6天时,组织块周围开始有长梭形细胞爬出;第7~9天时,细胞爬出较少的呈网状生长,组织块周围细胞爬出较多的呈漩涡状生长,致密排列呈束状;第10~14天时,细胞呈典型的“峰—谷”样结构,相互融合达80%,此时传代细胞生长速度增快,细胞变大,折光性减弱,免疫荧光染色鉴定可见VSMC特异性的α-平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)表达,表达的阳性细胞在95%以上。结论:成功建立一种可行的原代VSMC培养方法。

关键词(KeyWords): 血管平滑肌细胞;原代培养;组织块贴壁法;免疫荧光;大鼠,SpragueDawley

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(81360034,81560056)

作者(Author): 刘姿麟1,林慕之1,况春燕1,2,刘兴德3

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